2011基因问题-复习.docx

名词解释 基因工程 用人工方法, 在体外对DNA分子进行切割、连接，组成重组DNA分子，再导入生物体内,并使其在异种生物内复制、表达,从而使受体生物获得新的遗传性状,这一全过程称为基因工程。（PPT） 限制酶 限制酶是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列，并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。（21页） DNA连接酶 DNA连接酶是一种能够将两段DNA拼接起来的酶称为DNA连接酶。 （或DNA连接酶是一种能够催化双链DNA片段紧靠在一起的3`羟基末端与5`磷酸基团末端之间形成磷酸二酯键，使两末端连接起来的酶）（27页） DNA聚合酶 DNA聚合酶是能够催化DNA复制和修复DNA分子损伤的一类酶。（30页） DNA修饰酶 DNA修饰酶是一类通过添加或删除化学基团来修饰DNA分子的酶，主要有末端脱氧核苷酸转移酶（简称末端转移酶）、碱性磷酸酶、T4噬菌体多核苷酸激酶等。（22页与网上整理结合） 质粒 质粒是一些存在于微生物细胞染色体外的小型闭合环状双链DNA分子，是能够进行独立复制并保持恒定遗传的复制子。（42页） 穿梭质粒 穿梭质粒载体是指一类由人工构建的具有两种不同复制起点和选择标记，因而可在两种不同的寄主细胞中存活和复制，并可以携带着外源DNA在不同物种的细胞之间往返穿梭的质粒载体。（56页） 噬菌粒 噬菌粒是一类由质粒载体和单链噬菌体载体结合而成的新型载体系列。（77页） 粘粒载体 粘粒又称柯斯质粒，是一类由人工构建的含有λDNA粘性末端cos序列和质粒复制子的杂种质粒载体。（70页） M13噬菌体载体 M13噬菌体是一种含有6.4kb环状单链DNA分子的大肠杆菌丝状噬菌体。（73页及PPT） 克隆载体 克隆载体是指具有在细胞内进行自我复制能力的DNA分子，是外源基因的运载体，又称无性繁殖载体。（PPT） 末端脱氧核苷酸转移酶 末端脱氧核苷酸转移酶是一种来源于小牛胸腺，为核酸末端加上一个同聚物尾巴的DNA修饰酶。（PPT） T4噬菌体多核苷酸激酶 T4多聚核苷酸激酶（T4 polynucleotide kinase）酶是由T4噬菌体的pseT基因编码的一种蛋白质。该酶催化r(是拉丁文不是字母)-磷酸从ATP分子转移给DNA 或RNA分子的 5’-OH末端,生成5’－P。(PPT) 碱性磷酸酶 碱性磷酸酶有两???不同来源，一种是从大肠杆菌中纯化出来的细菌碱性磷酸酶，另一种是从小牛肠中纯化出来的小牛肠碱性磷酸酶。它们的共同特性是能够催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA（或RNA）的5’-P末端转化为 5’-OH末端。（36页） 定向克隆 当用两种不同的限制酶消化外源DNA时，可以产生非互补突出末端的外缘DNA片段，此种片段可采用定向克隆法，即只以一个方向很容易地将其插入到同样用这两种限制酶进行消化而产生相匹配粘端的载体当中。（104页） DNA体外重组 DNA体外重组是将目的基因用DNA连接酶在体外连接到合适的载体DNA上，这种重新组合的DNA称为重组DNA。（101页） 转化 把带有目的基因的重组质粒DNA引入受体细胞的过程称为转化。（116页） 转染 将重组噬菌体DNA直接引入受体细胞的过程称为转染。（117页） 转导 若重组噬菌体DNA被包装到噬菌体头部成为有感染力的噬菌体颗粒，再以此噬菌体为运载体，将头部重组DNA导入受体细胞中，这一过程称为转导。它比转染的克隆形成效率要高出几个数量级。（117页） 电穿孔转化法 该法可用于DNA导入真核细胞和细菌，是利用瞬间高电压，瞬时提高细胞膜的通透性，从而将外源DNA导入受体细胞的技术。（118页及百度百科） 化学转化法 氯化钙法转化是常用的化学转化法，适用于大部分大肠杆菌菌株，并具有简单快速、重复性好的优点。原理是细菌在低温下经CaCl2溶液处理，细菌细胞膨胀成球形，提高膜的通透性，转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面，经42℃短时间热击处理可促进细胞吸收DNA复合物。（117页） （以上资料来源：赖万豪同志） 定向克隆：当用两种不同的限制酶（如BamHⅠ和HindⅢ）消化外源DNA时，可以产生带有非互补突出末端的外源DNA片段。只以一个方向将其插入同样用BamHⅠ和HindⅢ进行消化而产生相匹配的载体中。 DNA体外重组：将目的基因用DNA连接酶在体外连接到合适的载体DNA上。 转化：将带有目的基因的重组质粒DNA引入受体细胞的过程。 转染：将带有目的基因的重组噬菌体DNA直接引入受体细胞的过程。 转导：将带有目的基因的重组噬菌体DNA包装到噬菌体头部成为有感染力的颗粒， 再倒入受体细胞中的过程。 电穿孔转化法：将宿主细胞置于 HYPERLINK /view/63151.htm 高压脉冲电场中，通过电击使细胞产生可逆性的