依那普利厄贝沙坦血管紧张素-(1-7)对心房离子重构的预防作用.doc

依那普利、厄贝沙坦、血管紧张素-(1-7)对心房离子重构的预防作用HYPERLINK /ShowUnits.asp?ID=71Untype=1 \t _blank \o 查看该来源全部文章天津医科大学第二医院 作者：HYPERLINK / \t _blank \o 进入李广平的主页李广平　HYPERLINK / \t _blank \o 进入刘恩照的主页刘恩照　HYPERLINK / \t _blank \o 进入杨万松的主页杨万松　 2009-9-15 ??? 心房颤动（Atrial Fibrillation, AF）是目前临床最常见的心律失常之一。AF本身会改变心房电生理特性，该过程被称为电重构。AF患者心房L型钙电流（ICaL）离子通道a1C亚单位mRNA和通道蛋白表达下降，瞬时外向钾电流(ITO) Kv4.3亚单位mRNA和蛋白也有下降。ICaL抑制是动作电位时程（Action Potential Duration, APD）和心房有效不应期（Atrial Effective Refractory Period，AERP）变化的决定因素。以血管紧张素转换酶抑制剂（Angiotensin-Converting Enzyme Inhibitor, ACEI）或血管紧张素II受体拮抗剂（Angiotensin II Receptor Blocker, ARB）抑制心脏肾素-血管紧张素系统（Renin-Angiotensin System, RAS）会影响AF的病生理基质，减少AF发生。另外，1988年RAS重要成员血管紧张素-(1-7)[Angiotensin-(1-7), Ang-(1-7)]被发现。升高循环Ang-(1-7)浓度使心肌细胞增生反应减轻，再灌注心律失常减少，首次证实了Ang-(1-7)的心肌保护作用。本文通过实验研究讨论慢性心房起搏犬模型心房重构过程中ACEI依那普利、ARB厄贝沙坦及Ang-(1-7)对各离子通道表达与离子电流变化的干预作用。 ??? 实验方法 ??? 以健康成年杂种犬制作心房快速起搏模型。将各犬以3%戊巴比妥钠静脉麻醉后经右颈外静脉置入右房电极，远端连接高频起搏器（AOO模式）。起搏电压5 V，脉宽0.2 ms，频率500次/分。起搏过程中，Ang-(1-7)（A）组经左颈外静脉以Alzet?渗透泵（DURECT, USA）持续泵入Ang-(1-7) 6μg·Kg-1·h-1。自起搏开始前3d，依那普利（EN）组及厄贝沙坦（IB）组分别口服依那普利2mg·kg-1·d-1、厄贝沙坦60mg·kg-1·d-1至实验结束。心房起搏对照（C）组给予单纯心房起搏。假手术（S）组安置起搏器如前，但不行起搏刺激。每组6只犬，维持起??2周后，麻醉开胸取下心脏。使用冠脉回旋支插管灌流，酶法分离左心房肌细胞，以全细胞膜片钳制技术研究单细胞电生理特性。以5ms 2倍阈值脉冲诱发动作电位（AP），分别记录刺激100bpm、300bpm、400bpm、500bpm、600bpm的AP，测量复极90%、50%动作电位时程（APD90，APD50）。并记录单个心房肌细胞ICaL和ITO。另取部分心房肌组织提取总RNA行基因表达研究，利用RT-PCR技术观察ICaLα1C和ITO Kv4.3亚单位mRNA在各组心房的表达情况。 ??? 结果 ??? 由表1可见，心房起搏后，在各刺激频率下C组细胞APD90显著缩短，APD50无明显改变。依那普利不能预防APD缩短。IB组和A组，APD90缩短不显著。由表1及图1可见，在S组，随着刺激频率增加APD90进行性缩短（即APD的频率适应性）。C组此频率适应现象丧失，EN组亦无频率适应性。IB组与A组，频率适应性有所恢复。ITO最大电流密度在C组（n=9, 8.72±4.35pA/pF）和IB组(n=8，10.62±7.24pA/pF)低于S组(n=11，17.60±6.49pA/pF)（P0.05）；EN组(n=8，29.99±14.78pA/pF)的ITO最大电流密度大于C组（P0.01），亦大于S组（P0.01）；A组(n=9，14.11±5.04pA/pF)较S组下降不显著（P0.05）（图2）。ICaL最大电流密度在C组(n=10,-2.96±1.55pA/pF）、EN组（n=7, 2.71±2.03pA/pF）和IB组（n=7, -2.57±0.87pA/pF）低于S组（n=9，-5.84±2.29pA/pF）（P0.01）；A组(n=9, -5.74±3.43pA/pF)与S组无差异（P0.05）（图3）。Kv4.3 mRNA表达在C组、IB组低于S组（P0.01）；EN组高于C组（P0.01），亦高于S组（P0.01）；A组与S组