指纹图谱-高效液相.ppt

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指纹图谱-高效液相

指纹图谱文献查阅总结;查阅文献名称;查阅文献名称;查阅内容总结;指纹图谱的概述;中药指纹图谱研究意义;指纹图谱在评价中药质量中的作用;指纹图谱在评价中药质量中的作用;指纹图谱中,各色谱峰所代表的物质的光吸收曲线不可能相同,而物质含量检测的理想条件是获得待测物质的光吸收曲线峰值或最大值,因此,固定单波长下精确的检测色谱峰所代表的多种物质含量是不可能的。 如果可以获得指纹图谱中个色谱峰的代表物质光吸收峰值,就可精确测定这些物质的含量,而二极管阵列检测器的应用使同时精确测定的多种物质的含量成为可能。;中药指纹图谱技术分类;中药的高效液相指纹图谱分析方法;指纹图谱测定实验步骤;样品的溶液制备选择方法 1.提取方法的选择(冷浸,回流,超声,微波等),需要对实验图谱比较不同提取液和提取方法对色谱峰的影响来选择合适的方法,最???还需要对选择的溶液制备方法进行优化。 2.不同溶剂提取对色谱峰的影响 确定溶剂及提取方法后,观察不同浓度溶剂对色谱峰影响 和峰型影响,在保证提取时所有组分峰出现并稳定的同时要确保样品溶液与初始流动相的性质尽量保持一致,这样可保证峰多的同时畸形峰也少。 HPLC流动相的选择 乙腈-水,甲醇-水,乙腈-磷酸水溶液,乙腈-乙酸水溶液 流动相组分溶液浓度对色谱峰影响 在选择流动相体系若酸度较大时,峰型好的同时还须考虑色谱仪酸承载能力 ;开始方法建立;色谱柱的冲洗和预平衡:;若用硅胶色谱柱应保持流动相PH在3.0~8.0之间。 柱子过夜要冲洗掉盐类和缓冲液,以纯流动相保存。 为了避免漏检样品中可能存在的化合物,建议用洗脱能力非常强的流动相,做第一次预实验,然后按照一定速度(20%)降低强溶剂的比例。;确定方法的有效性;分析方法的评价方式;图谱峰的确认;;;;三 压力降;3-4 色谱柱问题的解决方案;用良好的流动相条件,包括PH、缓冲溶液种类及浓度、添加剂,尽量减小硅胶基质的“次级作用”。;正常使用前后色谱柱要强溶剂冲洗;;梯度洗脱

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