CDK44信号在卵巢癌生长和化疗增敏中的作用.PDF

· · J South Med Univ, 2017, 37(3): 393-397 doi 10.3969/j.issn.1673-4254.2017.03.20 393 临床研究 ?????miR-206/CDK4??? 凌 晨，刘 蜀，王 勇，张逢春，杜 鹰 贵州省贵阳市妇幼保健院，贵州 贵阳 550003 摘要：探讨miR-206/CDK4信号在卵巢癌生长和化疗增敏中的作用。方法 分别提取卵巢癌和癌旁组织总RNA并将它们逆转 录成cDNA。实时荧光定量PCR检测miR-206在卵巢癌和癌旁组织中差异表达。在将miR-206 mimic和其特异抑制剂以及它 们各自对照分别转染卵巢癌细胞后，MTT和流式细胞仪用于检测细胞增殖和细胞周期的改变。Western blot和荧光素酶报告基 因活性分析鉴定miR-206的靶基因和其调控信号通路。miR-206诱导5-Fu对卵巢癌细胞化疗增敏作用被鉴定。结果 荧光定 量PCR分析显示，miR-206在卵巢癌组织中表达明显下调。在转染miR-206 mimics后，细胞的增殖明显抑制，细胞周期也出现 G/S转化障碍。机制分析显示，miR-206 mimic能明显抑制CDK4，c-Myc和CCND1表达。与之相反，在使用miR-206特异抑制 剂后，细胞的增殖能力明显恢复，而 CDK4 表达能明显增高。荧光素酶报告基因活性分析显示，miR-206 能直接结合 CDK4 P 3UTR。药敏分析显示，miR-206能明显降低IC50值（ 0.001），从而增加5-Fu对卵巢癌细胞的敏感性。结论 miR-206作为候选 抑癌基因，直接靶击CDK4基因，从而抑制了卵巢癌细胞生长，并诱导了5-Fu对卵巢癌细胞的化疗敏感性。 关键词：miR-206；CDK4；卵巢癌 Role of miR-206/CDK4 in modulating the growth and chemotlerapy sensitivity of ovarian cancer cells LING Chen, LIU Shu, WANG Yong, ZHANG Fengchun, DU Ying Guizhou Maternity and Child Health Hospital, Guiyang 550003, China Abstract: Objective To explore role of miR-206 in modulating the growth and chemotherapy sensitivity in ovarian cancer cells. Methods Real-time PCR was used to detect the expression of miR-206 in ovarian cancer and normal ovarian tissues. Ovarian cancer SKOV3 cells were transfected with a miR-206 mimic o