猪附红细胞体论文：猪附红细胞体 全基因合成 克隆表达 功能分析汇.doc

猪附红细胞体论文：猪附红细胞体ORFs基因合成、表达及鉴定 【中文摘要】猪附红细胞体(Mycoplasma suis, M.suis)在伯杰氏手册中被划分为立克次氏体,但目前国际上根据其16sRNA序列,普遍认为应属于支原体。M.suis是一种寄生于猪红细胞上的微生物,能够引起猪的溶血性贫血、黄疸等为主要特征的血液感染性疾病。近几年猪附红细胞体病在全国范围内大面积爆发和流行,对我国的养猪业造成极大的经济损失。为更好的控制该病的发生,我们必须从该病的病原上对其进行详细的研究。在Genebank中可以查到的能够表达成蛋白质的序列共有5条,分别是rnpB,无机磷酸酶,MSG1,HspA1和猪附红细胞体ORF1、ORF2、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6、ORF7、ORF8、ORF9、ORF10、ORF11 DNA序列,Hoelzle等通过鸟枪法对M.suis基因组文库进行测序,发现了MSG1蛋白,该蛋白与3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)具有高度同源性,并且该蛋白是具有粘附猪红细胞功能的M. suis膜蛋白,不同的分离株中MSG1的序列高度保守,并且证明HspA1蛋白具有三磷酸腺苷酶活性和抗原性,但对rnpB,无机磷酸酶和ORFs的功能知之甚少。由于M.suis没有最佳的... 【英文摘要】Mycoplasma suis (M. suis) were formerly classified as the rickettsial agent, Eperythrozoon suis, but comparative sequence analysis of the 16sRNA sequence, the international community generally reclassification it together with Mycoplasma. M. suis is a micro-organism which parasitized on the porcine red blood cells; it can cause a febrile acute anemia and icterus with low morbidity and high mortality as the main characteristics of blood infections diseases. In recent years, M. suis disease was nationwide out... 【关键词】猪附红细胞体 全基因合成 克隆表达 功能分析 【英文关键词】Mycoplasma suis (M. suis) synthesizing cloning expression functional analysis 【索购全文】联系Q1：138113721 Q2：139938848 同时提供论文写作一对一辅导和论文发表服务.保过包发 【目录】猪附红细胞体ORFs基因合成、表达及鉴定 中文摘要 9-11 Abstract 11-12 1 前言 13-23 1.1 附红细胞体的概述 13-22 1.1.1 病原学 13-16 1.1.2 附红细胞体流行史 16-17 1.1.3 致病机理 17 1.1.4 目前研究的重要的猪??红细胞体基因 17-18 1.1.5 附红细胞体的诊断 18-21 1.1.6 治疗 21-22 1.2 全基因合成技术 22-23 2. 材料与方法 23-39 2.1 菌种与质粒 23 2.2 试剂和酶 23 2.3 常用缓冲液及仪器设备 23 2.4 引物设计与合成 23-27 2.4.1 ORF2 的引物设计与合成 23-24 2.4.2 ORF4 的引物设计与合成 24-25 2.4.3 ORF5 的引物设计与合成 25-26 2.4.4 ORF9 的引物设计与合成 26-27 2.5 全基因合成 27-29 2.5.1 ORF2 的全基因合成 27-28 2.5.2 ORF4 的全基因合成 28 2.5.3 ORF5 的全基因合成 28-29 2.5.4 ORF9 的全基因合成 29 2.6 基因的克隆与测序 29-33 2.6.1 ORF2 基因的克隆与测序 29-32 2.6.2 ORF4 基因的克隆与测序 32 2.6.3 ORF5 基因的克隆与测序 32-33 2.6.4 ORF9 基因的克隆与测序 33 2.7 基因表达载体的构建 33-34 2.7.1 ORF2 基因表达载体的构建 33 2.7.2 ORF4 基因表达载体的构建 3