08章节 自动生化分析仪分析技术.pptVIP

第八章 自动生化分析仪分析技术;　　　　　　自动生化分析仪 　　（automatic biochemical analyzer） 提高质量和速度 减轻劳动强度 节约样品和试剂 有利于标准化 ;目　录 ;第一节　自动生化分析仪分类 ;一、 概 述（一）连续流动式自动生化分析仪;（二）分立式自动生化分析仪;（三）离心式自动生化分析仪;离心式分析仪工作原理;（四）模块式分析系统（组合式自动分析仪）;（五）全实验室自动化（total laboratory automation，TLA）;二、分立式自动生化分析仪的分析原理;分立式分析仪基本结构 ;（一）样品盘或样品架（specimen disc or rack ）;样品架;样品架的优点;（二）试剂室（reagent chamber）和试剂瓶;外圈为第一试剂，内圈为第二试剂;奥林帕斯AU2700试剂仓 （盖子打开后）;（三）反应杯（reaction cuvette）和反应盘;反应杯与反应盘（一体化）;双圈比色杯组（分内圈和外圈）;（四）取样和加试剂装置;取样装置;2．加试剂装置;（五）混匀装置;日立7170生化仪;（六）温浴系统;（七）光学检测系统;前分光、后分光生化分析仪测光原理 ;后分光技术的优点 ;（八）清洗系统;清洗针示意图;（九）计算机控制系统;三、干化学分析系统;（一）反射光度法（reflection spectroscopy） ;①渗透扩散层：样品迅速均匀渗透，阻止颗粒成分和蛋白质等大分子向下渗透 ②反射层：白色不透明层，下侧涂布反射系数95%的物质如BaSO4，能隔离渗透扩散层中有色物质 ③辅助试剂层：去除血清中的内源性干扰物，如固定维生素C氧化酶以消除血清中维生素C对H2O2的还原作用 ④试剂层：即反应层，固定了该检测项目所需的试剂 ⑤支持层：透明塑料基片，允许反射光完全透过，而样品浓度与反射光强度成反比 试剂层和支持层之间可加一吸水层加快样品和试剂的渗透速度 ;（二）差示电位法（differential potentiometric determination method） ;（三）干式化学分析仪的优点 ;（四）干式化学分析仪的缺点;一、常用分析方法 （一）终点法 （二）连续监测法 二、分析参数设置 （一）基本分析参数 （二）特殊分析参数 （三）分析参数设置举例; 两类基本分析方法 任何方法均以一定间隔时间测定化学反应全过程吸光度值;时间-吸光度曲线;（一）终点法（end assay）;1．一点终点法（one point end assay）;2．两点终点法 （two point end assay）;两点终点法的作用;固定时间法（fixed-time assay）;苦味酸法测定肌酐;溴甲酚绿法测定血清清蛋白 ;（二）连续监测法（continuous monitoring assay）;二、分析参数设置（analysis parameters）;（一）基本分析参数;（2）次波长（secondary wavelength）;选择双波长常用的方法 ;次波长设置原则： 使干扰物在主、次波长处有尽可能相同的光吸收值。 被测物在主、次波长处的光吸收值有较大差异 次波长一般大于主波长100nm，主要考虑脂浊问题 免疫比浊法测定时次波长的选择，则是距离主波长越远越好，以得到较高的灵敏度 #采用理论K值测定酶活性： 有些指示物在次波长也有明显的光吸收，ε必须进行修正;4. 反应方向(response direction)：正向反应和负向反应 5．样品量(sample volum)与第一试剂量和第二试剂量 根据分析仪 可加样体积范围 可加试剂体积范围 反应液总体积范围 将样品量的常量设置到较小量（其减量可至最小加样量） 按试剂说明书规定的试剂样品体积比确定第一和第二试剂量 三者总体积需在反应液总体积范围内。;6. 第二试剂（R2）加入时间 样品和R1加入时间定在反应开始时，R2时间不同分析仪有所不同 某些分析仪只有一个固定时间，有些分析仪则有两个时间点可选。 多数情况选择较早加入R2 以利于终点法确实到达终点，连续监测法延滞期和线性期足够。 少数情况较迟加入R2 选择性抑制法测定HDL-C，R1与血清中非HDL需充分反应使其受抑制，这个过程需要3 min～5min。 免疫抑制法测定CK-MB，R1中的抗体抑制M亚基需一定时间。;7.终点法读数时间　 一点终点法：时间-吸光度曲线最后一个测光点 两点终点法：分别为R2加入前的测光点和最后一个测光点 8. 速率法读数时间 （1）延迟时间（delay time）：速率法中从样品与反应试剂混匀开始至进入线性期所需的时间 存在原因：内源性干扰物或抑制剂。延迟