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实验二总糖及还原糖的测定
实验二 总糖和还原糖的测定 (3,5~二硝基水杨酸法) ;掌握3,5~二硝基水杨酸法测定待测样品的总糖和还原糖含量的基本原理,学会处理721型或722型分光光度计出现的问题 ;二、实验原理;;三、实验步骤;取7支25×250mm的试管,分别按下表加入试剂:;2、样品中总糖和还原糖含量的测定
(1)样品中还原糖的提取:
准确称取10g新鲜材料(或2g材料干样粉末),放在100ml烧杯中,先以少量水调成糊状,然后加50~60ml蒸馏水,于50℃恒温水浴中保温20min,过滤,将滤液收集在100ml容量瓶中,再定容至100ml。;;(3)样品中糖含量的测定:取7支25×250mm试管分别按下表加入试剂:;四、实验结果;五、讨论分析;附:仪器和试剂
主要仪器:分光光度计,水浴锅,容量瓶,刻度试管,移液管等。
3,5-二硝基水杨酸试剂:
甲液:溶解6.9g结晶酚于15.2ml 10%氢氧化钠溶液中,并用水稀释至69ml,??此溶液中加6.9g亚硫酸氢钠。
乙液:称取255g酒石酸钾钠加到300ml 10%氢氧化钠溶液中,再加入880ml 1% 3,5-二硝基水杨酸溶液。
将甲乙二溶液混合即得黄色试剂,贮于棕色瓶中备用。在室温放置7-10天后使用。
6 mol?L-1 盐酸
10%氢氧化钠溶液
酚酞指示剂
碘~碘化钾溶液:称取5g碘,10g碘化钾溶于100ml蒸馏水中。
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