碱性化合物拖尾解决方案4.pdf

色谱大讲堂 第五讲 碱性化合物拖尾解决方案(4) 3、流动相的调节。 讨论： 3.3 流动相 pH 值的选择。 ① 分析碱性化合物的时候，不适宜用 pH≥3.5 对碱性化合物来说，流动相的 pH 不仅仅对峰 的色谱条件，因为这样会使游离硅羟基大大 形，还对保留因子和选择性都有很大影响。一般来 增加，二级反应增大，导致碱性化合物拖尾 说，我们建议碱性化合物的流动相 pH≤2.5,会有比 严重。 较好的峰形。 ② 对于一些碱性较弱的化合物（pKb9）的化合 物，也可以选用碱性条件较稳定的色谱柱（pH 原理： 稳定范围～12）,在碱性条件下分析。这时候 1.碱性化合物在酸性条件下会解离成离子状态； 流动相的 pH 要依据化合物的 pKb 确定，pH≥ 2.pH≤2.5 会使固定相游离硅羟基解离受抑制，减 pKb+2。目的是使碱性化合物的解离完全被抑 小对碱性阳离子的二级反应。 制，消除与固定相解离硅羟基的二级作用（这 个时候硅羟基完全解离）。但对于 LC/MS/MS 方法，我们建议谨慎选用碱性流动相条件， 因为碱性流动相条件下，即便是宽 pH 范围的 色谱柱，流失也会增大，MS 检测器有被污染 的风险。 当 pH=2.5 的时候，解离平衡向左移动，非解离状 ③ 选择流动相 pH 值时，还要考虑固定相的稳定 态的构型会比平衡状态时增加 90%，解离状态的构 性。对于一些???期的色谱柱产品，pH2.5 已 型降为平衡状态时的 10%。 经是极限，可以适当将 pH 调到 3。 ④ 调节流动相 pH 值的酸碱调节剂必须是具有 缓冲能力的试剂，不建议直接使用强酸、强 碱调节流动相 pH。 如有任何疑问，请及时与我公司联系！