1020液相色谱操作规程.PDF

1020 液相色谱操作规程 一．开机 分别打开检测器及输液泵的电源开关（开关位于仪器后面板左侧偏下）；仪器进行自检， 过一分钟后再打开电脑上的色谱工作站软件。 二．输液泵排气 把事先配置好的流动相放到仪器上方的溶剂托盘上，把输液泵吸滤头插入到流动相储液 瓶中并且确保滤头接触到瓶底；往逆时针方向打开输液泵的放空阀约 1 圈，按“清洗” （PURGE）键（此时该按键旁边的绿色指示灯亮起）泵按照默认的大流速 3ml/min 运 行，直到流动相输送管里面没有气泡即可再次按“PURGE”键停止排气（此时该按键旁 边的指示灯灭掉），最后顺时针关紧排气阀。 注意：按“PURGE”按钮前必须确保泵的排气阀门已经打开，关闭排气阀门前必须确保 输液泵已经停止排气即“PURGE”旁边的指示灯灭掉。 三．参数设置 1. 点击色谱软件上面的“控制面板”按钮，此时跳出“控制面板”界面并且下方的“仪器 运行信息”中提示：A,B 泵联机成功；检测器联机成功。 2. 泵设置：根据分析需要进行等度或者是梯度设置 3.等度设置： 3-1.在控制面板上“基本控制”栏中设置“流速”（ml/min）,设置好后必须点击旁边的“确 认”按钮。 3-2.设置 A.B 泵的比例；如果单泵的话直接将 A 泵的比例设置 100%并点击旁边的“确认” 按钮；若是 A.B 泵，则输入 A 泵的比例后点击旁边的“确认”按钮则 B 泵的比例自动为 B=100%-A。 4.梯度设置 4-1.选中“梯度控制”项中的“使用梯度表” 4-2.在梯度表中根据梯度方法进行梯度程序编写，编写时必须一行一行往下，不能跳行。 4-3.确保“基本控制”栏中的流速与梯度表中的流速一致，A.B 的比例必须与梯度表中的初 始比例一致。 5.工作压力阈值设置：最大压力（MP）通常设置为 20MP，最小压力设置为 0.1MP，设置完 后必须点击旁边的“确认”按钮。 6．冲洗设置：仪器默认的冲洗流速为 3ml/min,冲洗时间为 3min, 若需要更改则输入新的数 值后必须点击旁边的“确认”按钮。 注意：按“冲洗”按钮前必须把泵的排气阀门往逆时针旋转 1 圈左右，冲洗结束后必须把排 气阀门往顺时针关紧；此功能同第二项“运行”的清洗功能一摸一样。 7．设置检测波长：点击“控制面板”上的“检测器”项；在“基本控制”栏的“波长”框 中输入需要的波长并点击旁边的“确认”即可，时间常数已软件默认的值“1”即可。 8．打开色谱柱温箱电源，温度默认为 40 度，如果必要可以根据实际更改温度，但是最高温 度不允许超过 60 度。 四：运行 1． 点击“控制面板”上的“输液泵”项，点击“基本控制”中的“启动”功能运行输液泵， 观察输液泵显示屏上的压力是否正常上升，且显示的比例是否于软件上设置的一样。 2． 点击软件上的采集谱图按钮（该按钮为绿色小圆点，采集数据过程中为红色），观察基 线，系统运行 30 分钟后若基线稳定了即可停止采集，按一下检测器上的“Zero”按键 将检测器吸光度归零。 五：样品分析 1． 用流动相（或者甲醇）将微量进样针清洗 2-3 次，将六通进样阀切换到 LOAD 位置且用 待测标准样品或者是供试品清洗 2-3 次。 2． 吸取一定体积的对照或供试品进入到六通进样阀，按一下检测器上的“Zero”并迅速将 六通进样阀的把手切换的 INJECT 位置，此时样品被流动相带入到色谱柱并且色谱工作 站开始同步记录色谱图。 3． 待样品的所有组份都流出色谱柱时（即色谱峰已经全部出来且基线已经平稳），点击色 谱工作站上的红色小圆点停止采集谱图并保存。 注意：在进样前必