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第六章 发酵过程控制;1. 过程控制的重要性;2. 发酵过程控制的一般步骤 ;3. 参数检测;参数按获取方式可分为两类:
直接参数:如T、pH、罐压、空气流量、搅拌转速、溶氧浓度等
间接参数:将直接参数通过公式计算获得的参数,如摄氧率(γ)、呼吸强度(QO2)、比生长速率(μ)、体积溶氧系数(KLa)、呼吸商(RQ)等。;离线测量:基质(糖、脂类、无机盐等)、前体和代谢产物(抗生素、酶、有机酸、氨基酸等)
在线测量:如T、pH、DO、溶解CO2、尾气CO2、黏度、搅拌转速等; 伴随发酵的进行而产生的热量叫发酵热;发酵热的产生引起发酵液温度变化。在发酵过程中,某些因素导致热的产生,另外一些因素又导致热量散失。
产热散热 ? 净热量堆积 ? 发酵液的温度上升;
相反,产热小于耗热,温度下降。;生物热(Q生物);具有时间性;
具有生物特异性;
与营养有关;;搅拌热(Q搅拌);蒸发热:空气经发酵液时,发酵液中有部分水汽化,变成水蒸气,随空气一起排出罐外,这部分水汽化时带走的热量用Q蒸发表示,假设进出口气体温度相同,则由通气带走的热量为:
Q蒸发=G(I出-I进),G:空气流量;I:气体热焓;;散热的情况:; 温度影响微生物生长的机理
(1)影响酶活性。
(2)影响细胞膜的流动性。
(3)影响物质的溶解度。;嗜冷菌适应于0~26℃生长,嗜温菌适应于15~43℃生长,
嗜热菌适应于37~65℃生长,嗜高温菌适应于65℃上生长 ;(1)有最适宜温度范围。
(2)高温使蛋白质凝固。耐热能力与pH值有关。;;不能低温合成蛋白质。
低温微生物可合成冷休克蛋白。
微生物受高温的伤害比低温的伤害大,低于最低温度,微生物代谢受到很大抑制,并不马上死亡。这就是菌种保藏的原理。;(1)影响发酵过程中各种反应速率,从而影响微生物的生长代谢与产物生成。
(2)改变发酵液的物理性质,间接影响菌的生物合成。
(3)影响生物合成方向。
(4)温度对菌的调节机制关系密切。
(5)影响酶系组成及酶的特性。;5 . 温度的控制;前期菌量少,取稍高的温度,使菌生长迅速;
中期菌量已达到合成产物的最适量,发酵需要延长中期,从而提高产量,因此温度要稍低一些;
后期产物合成能力降低,延长发酵周期没有必要,就又提高温度,刺激产物合成。;2)根据培养条件选择;菌生长快,维持在较高温度时间要短些;菌生长慢,维持较高温度时间可长些。培养条件适宜,如营养丰富,通气能满足,那么前期温度可髙些,以利于菌的生长。
总的来说,温度的选择根据菌种生长阶段及培养条件综合考虑。要通过反复实践来定出最适温度。;第二节 pH对发酵的影响及其控制; (1)C/N过高,或中间补糖过多,溶氧不足,致使有机酸积累,pH下降;
(2)消泡剂加得过多:脂肪酸增加;
(3)生理酸性盐的利用;
(4)酸性产物形成:如有机酸发酵。; (1)C/N过低(N源过多),氨基氮(NH4+)释放;
(2)中间补料中氨水或尿素等碱性物质加入过多;
(3)生理碱性盐的利用;
(4)碱性产物形成。 ;二、发酵过程中pH的变化规律;1. pH对微生物生长的影响;2. pH对产物合成的影响;pH影响代谢方向: pH不同,往往引起菌体代谢过程不同,使代谢产物的质量和比例发生改变。
e.g. 黑曲霉发酵:pH2~3, 柠檬酸;pH接近中性,草酸
酵母菌发酵:pH4.5~5.0,酒精;pH8.0,酒精、醋酸和甘油
谷氨酸发酵:pH7.0~8.0,谷氨酸;pH5.0~5.8, 谷酰胺和N-乙酰谷酰胺;影响酶的活性。
影响菌体细胞膜电荷状况,引起膜的渗透性的变化,因而影响菌体对营养的吸收和代谢产物的形成。
影响培养基某些重要的营养物质和中间代谢产物的离解,从而影响微生物对这些物质的利用。
影响代谢过程的不同,使代谢产物的质量和比例发生变化。;四、 最适pH的选择 ; 调节好基础料的pH。
在基础料中加入维持pH的物质,如CaCO3,或具有缓冲能力的试剂,如磷酸缓冲液等。
通过补料调节pH。; 在发酵过程中根据糖氮消耗需要进行补料。在补料与调pH没有矛盾时采用补料调pH,如
(1)调节补糖速率,调节空气流量来调节pH
(2)当NH2-N低,pH低时补氨水;当NH2-N低,pH高时补(NH4)2SO4
当补料与调pH发生矛盾时,加酸碱调pH ;改变搅拌转速或通气量,以改变溶解氧浓度,控制有机酸的积累量及其代谢速度;
改变温度,以控制微生物代谢速度;
改变罐压及通气量,降低CO2的溶解量;
改变加油或加糖量等,调节有机酸的积累量;;1、泡沫的产生、性质及变
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