注射用清开灵冻干粉体外抗菌活性研究的论文.docVIP

　　注射用清开灵冻干粉体外抗菌活性研究的论文 【摘要】 目的：研究注射用清开灵冻干粉对临床分离致病菌的体外抗菌活性。方法：注射用清开灵冻干粉与市售清开灵注射液作比较，采用二倍稀释法，测定注射用清开灵冻干粉浓缩液对临床分离的47株致病菌的最低抑菌浓度（mic）及最低杀菌浓度（mbc），观察注射用清开灵冻干粉体外抗菌活性。结果：对金葡菌、大肠埃希菌、铜绿假单孢菌、肺炎克雷伯菌，注射用清开灵冻干粉与市售清开灵注射液均显示出良好的体外抗菌活性，注射用清开灵冻干粉体外抗菌活性强于市售清开灵注射液。按药液稀释度计算，注射用清开灵冻干粉浓缩液对金葡菌、大肠埃希菌、铜绿假单孢菌、肺炎克雷伯菌的mic和 mbc分别为市售清开灵注射液的1/4～1/2。结论：注射用清开灵冻干粉对临床分离的致病菌，具有较好的抗菌活性，且略优于市售清开灵注射液。 【关键词】 注射用清开灵冻干粉；最低抑菌浓度；最低杀菌浓度 清开灵由金银花、黄芩、栀子、板蓝根、珍珠母、水牛角、胆酸等中药组成，具清热解毒、醒神开窍之功效。其有效成分金银花、板蓝根、黄芩、栀子均具有抗病原微生物作用，尤其对临床常见致病菌具有抑制和杀灭作用[1-3]。近年来对清开灵抗菌的报道以临床观察为主[4,5]，却鲜有实验室研究报道。清开灵冻干粉属药物新剂型，拟用于静脉滴注，本试验特采用二倍稀释法，测定其体外抗菌活性，为临床用药提供实验依据。 1实验材料 1.1药物与试剂注射用清开灵冻干粉，试验用药为冻干前浓缩液，生药计377.00mg·ml－1，提取物计84.20mg·ml－1，广州欧华医药生物技术有限公司提供。.cOm市售清开灵注射液，10ml/支，生药含量以75mg·ml－1计，其中含黄芩苷50mg、总氮25mg，神威药业有限公司生产。头孢曲松，批号0601026，海南三洋药业有限公司赠送。 1.2试验菌株及培养基金葡球菌10株，表皮葡萄球菌5株，肺炎链球菌5株，肠球菌属7株（肠球菌2株，粪肠球菌5株），大肠埃希菌5株，铜绿假单孢菌5株，肺炎克雷伯菌5株，沙门氏菌5株，共计47株。均为2005～2006年于北京、成都等地区收集的临床分离致病菌，经api方法及常规方法重新鉴定后使用。质控菌株为铜绿假单孢菌atcc27853，金葡球菌atcc25923、大肠埃希菌atcc25922，各1株，由四川抗菌素工业研究所提供。mh培养基，中国药品生物制品检定所产品。 2方法 2.1最低抑菌浓度（mic）的测定 采用琼脂二倍稀释法[6]测定注射用清开灵冻干粉、市售清开灵液对受试菌株的最低抑菌浓度（mic）。分别取注射用清开灵冻干粉浓缩液、市售清开灵注射液原液20ml，加至40ml融化的琼脂培养基（融化至50℃），混匀，从中吸出20ml至灭菌平皿内，余下的20ml琼脂中再添加入20ml无药琼脂混匀，再从中吸出20ml至下一个平皿内。以此类推，两倍稀释制备含药终浓度为原液浓度1/2、1/4、1/8、1/16、1/32、1/64、1/128、1/256、1/512、1/1024、1/2048（注射用清开灵冻干粉浓缩液相当于生药浓度188.50、94.25、47.13、23.56、11.78、5.89、2.95、1.47、0.74、0.37、0.18mg·ml－1）的系列平皿，冷却后再分别用多点接种仪（denley a400）于各平皿表面接种细菌，菌液终浓度为105cfu·ml－1。置于37℃中培养24小时，观察结果，以无细菌生长平皿内药物的最低浓度为该菌的最低抑菌浓度（mic）。以头孢曲松为阳性对照药，其终浓度分别为128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125μg·ml－1。 2.2最低杀菌浓度（mbc）的测定 选取2株金葡菌、2株表葡菌、2株大肠埃希菌、2株铜绿假单孢菌和2株肺炎克雷伯菌作为受试菌，先用液体二倍稀释法[6]测定出注射用清开灵冻干粉浓缩液、市售清开灵注射液对试验菌的mic值，再将未见细菌生长管的培养液转种于无药琼脂表面，37℃继续培养18小时，仍无细菌生长的药物最低浓度为最低杀菌浓度（mbc）。 3结果 3.1mic测定结果 注射用清开灵冻干粉浓缩液、市售清开灵注射液对所试临床分离致病菌的最低抑菌浓度（mic）见表1。 由表中可知，注射用清开灵冻干粉浓缩液对所试金葡菌、表葡菌、肺炎链球菌及肠球菌属，均具有较好的抗菌作用，mic值范围在1/1024～1/4原液浓度（相当于生药含量0.37～94.25mg·ml－1）。对所试大肠埃希菌、铜绿假单孢菌、肺炎克雷伯菌、沙门氏菌也具有一定抗菌活性，mic值范围为1/512～1/2原液浓度（相当于生药含量0.74～188.50mg·ml－1）。 市售清开灵注射液对金葡菌、表葡菌、肺炎链球菌及肠球菌的mic值范围