实验九 鉴定RNA的细胞化学方法——Branchet.pptx

胞间连丝的观察;实验目的;掌握徒手切片观察胞间连丝的方法。 掌握临时制片观察细胞中的膜泡结构。 ;实验原理;1.器材： 显微镜，载玻片，盖玻片，解剖刀，刀 片，镊子，剪刀。 2.试剂： 0.5%的蕃红水溶液。 3.材料： 红辣椒，玉米籽粒，洋葱。;1.红辣椒表皮细胞临时制片 取一小块红辣椒，用刀片小心刮出其果肉，留下一层极薄的表皮，放于载玻上，封片观察，镜检时光线不要太亮。 2.域名种子糊粉层临时制片 将玉米种子在水中浸泡一天，用镊子剥去表皮露出糊粉层，这是可以用镊子轻撕糊粉层放于水中，或制作徒手切片。刀口与糊粉层平行，切片极薄，封片观察。 3.洋葱表皮细胞观察 撕洋葱表皮一小块，0.5%番红染色2-3分钟，冲洗，封片观察。 ;实验目的;通过实验，了解branchet反应的原理及操作方法。 观察DNA、RNA在细??内分布的主要位置。 ;实验原理; Branchet 反应是假定细胞内的RNA的一种方法，主要是利用核酸分子上的负电荷(PO43-)与带正电荷的碱性染料结合形成盐键而在原位沉淀显色，所以它可以同时染出RNA和DNA。 Unna试剂中的甲基绿，(methyl green) 和DNA亲和力高，派若宁（Pyroin）和RNA亲和力高。因此DNA可被染成蓝绿色，而RNA被染成红色，通过观察细胞内不同颜色所分布的位置，可初步判断DNA和RNA在细胞内的分布情况。;1.材料：蚕豆根尖石蜡切片 2.试剂： （1） Unna染色剂 （2） 5%三氯醋酸 （3） 0.1%Rnase 的醋酸缓冲液 （4） 二甲苯 （5） 乙醇（70%，85%，95%，100%） （6） 丙酮 （7） 中性树胶 3.仪器： 显微镜、镊子、刀片、载玻片、盖玻片、酒精灯、滤纸、染色缸、吸水纸。;实验方法;实验方法;5%三氯醋酸;丙酮分色处理;二甲苯Ⅱ ;实验方法;;Unna试剂：