周建平－药品热原检查与细菌内毒素检查方法介绍.ppt

周建平;药品热原检查与细菌内毒素检查方法介绍;药品安全性检验内容;热原检查（Pyrogen Test);热原的含义;热原检查法基本原理;试验基本原理;热原剂量确定;热原检查法基本操作;实验材料及设备;实验准备;实验动物;实验环境;供试液配制;新兔预选;实验兔重复使用;家兔重复使用 ;检查法;注射体积和注射速度 ;结果判断;内毒素发热的峰型;影响实验的其他因素 ;鲎试剂与细菌内毒素检查法 ;细菌内毒素检查相关理论及概念;细菌内毒素;细菌内毒素定义变化; 细菌内毒素的生物活性 致热性 引起血液中粒细胞下降 激活凝血系统 血压下降 引起淋巴细胞的有丝分裂 与鲎试剂反应; 广泛存在 非常稳定 其疏水末端非常易于自身或者与玻璃容器结合而聚集，而不是与水混合 致热活性的高度不均一性 ;细菌内毒素标准品的建立; 标准内毒素 标准内毒素： 指经人工提取精制并经生物效价测定的细菌内毒素，作为细菌内毒素检查的标准品。 ; 80年代以前以重量作为内毒素的单位 1982年USP20引入以生物效价为量值的内毒素单位（ EU， Endotoxin Unit）; CP2000年版规定内毒素标准品溶解后要在旋涡混合器上混合15分钟，以后的每一步稀释前要至少混合30秒，其他国家药典也有类似要求； 具有两极活性的内毒素分子在水中呈现不均匀分布 不按要求进行旋涡混合会使所稀释的内毒素效价偏低，造成灵敏度标示偏高、阳性对照不凝等不正确的实验结果;Date;鲎试验的发现;鲎试剂：鲎血液变形细胞裂解物冷冻干燥制备而成 鲎试剂的种类： 依据鲎的种类分： 美洲鲎试剂（LAL） 中国鲎试剂（TAL） 圆尾鲎试剂（CAL） 依据检查方法分： 凝胶法鲎试剂和定量法鲎试剂 依据内毒素和鲎试剂反应的专一程度分： 普通鲎试剂和特异性鲎试剂;Date;灵敏度 自身凝集 缓冲能力 水分 微生物检查 ;C因子;美国和中国BET发展历史;国内鲎试剂的生产情况;细菌内毒素检查法的目的和前提;细菌内毒素检查法;凝胶法;光度测定法;一、 凝胶法 ;（一）检查法的描述;（二）实验准备-实验器具的要求;（二）实验准备-检查用水的要求;（二）实验准备－－工作标准品的稀释;（二）实验准备-供试品溶液的制备;（二）实验准备-供试品溶液的制备;（二）实验准备-供试品溶液的制备;（二）实验准备-供试品溶液的制备;（二）实验准备-供试品溶液的制备;（二）实验准备-供试品溶液的制备;（三）实验部分;鲎试剂灵敏度的复核;鲎试剂灵敏度的复核;鲎试剂灵敏度复核;鲎试剂灵敏度复核;鲎试剂灵敏度复核试验;鲎试剂灵敏度复核试验;凝胶法 ----凝胶限量试验;凝胶法 ----凝胶限量试验;凝胶法 ----凝胶限量试验;凝胶法 ----凝胶限量试验;凝胶法 ----凝胶限量试验;凝胶法 ----凝胶限量试验;凝胶法 ----凝胶限量试验;凝胶法 ----凝胶半定量试验;凝胶法 ----凝胶半定量试验;编号;凝胶法 ----凝胶半定量试验;凝胶法 ----凝胶半定量试验;凝胶法 ----凝胶半定量试验;凝胶法 ----凝胶半定量试验;凝胶法 ----凝胶半定量试验;凝胶法 ----凝胶半定量试验;凝胶法 ----凝胶半定量试验;凝胶法 ----凝胶半定量试验;凝胶法 ----凝胶半定量试验;凝胶法 ----凝胶半定量试验;凝胶法 ----凝胶半定量试验;凝胶法 ----凝胶半定量试验;凝胶法 ----凝胶半定量试验;;凝胶法 ----凝胶半定量试验;细菌内毒检查方法学研究的内容;一、前言：新品种细菌内毒素检查的设计原理;二、细菌内毒素限值（L)的确定;二、细菌内毒素限值（L)的确定;二、细菌内毒素限值（L)的确定;二、细菌内毒素限值（L)的确定;三、确定内毒素检查的有效浓度范围;三、确定内毒素检查的有效浓度;三、确定内毒素检查的有效浓度;三、确定内毒素检查的有效浓度;三、确定内毒素检查的有效浓度;三、确定内毒素检查的有效浓度;三、确定内毒素检查的有效浓度;三、确定内毒素检查的有效浓度;四、鲎试剂灵敏度的复核;四、鲎试剂灵敏度的复核;四、鲎试剂灵敏度的复核;四、鲎试剂灵敏度的复核;四、鲎试剂灵敏度的复核;五、凝胶法干扰试验;五、凝胶法干扰试验;五、凝胶法干扰试验;五、凝胶法干扰试验;五、凝胶法干扰试验;五、凝胶法干扰试验;五、凝胶法干扰试验;凝胶法干扰预试验;凝胶法干扰试验;五、凝胶法干扰试验;凝胶法干扰试验;编号 ;五、凝胶法干扰试验;五、凝胶法干扰试验;内毒素浓度;内毒素浓度;五、凝胶法干扰试验;五、凝胶法干扰试验;五、凝胶法干扰试验;六、制定药品质量标准;实验基本流程图;内毒素限值;举