全血[液体样本]microRNA提取试剂盒.docVIP

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 PAGE - 0 - PAGE - 0 -    ◆ TRIpure Reagent 抽提指南◆ 目录号 RP02◆ 使用手册◆ 实验室使用,仅用于体外◆ TRIpure Reagent 抽提指南◆ 目录号 RP02◆ 使用手册◆ 实验室使用,仅用于体外◆ TRIpure Reagent 抽提指南◆ 目录号 RP02◆ 使用手册◆ 实验室使用,仅用于体外 使用说明 ◆ BLOODmisi 全血(液体样本)microRNA快速提取试剂盒◆ 目录号 1124◆ 使用手册◆ 实验室使用,仅用于体外   PAGE - 7 - - 1 - BLOODmisi 全血(液体样本)microRNA快速提取试剂盒 目录号:1124 目录编号包装单位11240150次 适用范围: 适用于快速提取各种全血/血浆/液体样本miRNA和其它各种小RNA 试剂盒组成、储存、稳定性: 试剂盒组成保存50次Lysis buffer4°C避光50 ml70%乙醇室温9ml RNase-free H2O 第一次使用前按说明加指定量乙醇Wash Solution 1室温12 ml 第一次使用前加入28ml无水乙醇Wash Solution 2/3室温10 ml 第一次使用前加入42ml无水乙醇RNase-free H2O室温10 ml吸附柱RA和收集管室温50套microRNA吸附柱MA 和收集管室温50套本试剂盒按照指示储存6个月不影响使用效果。 储存事项: Wash Solution 1和Wash Solution 2/3加入无水乙醇后,可以在常温保存一个月,如果要更长时间保存,请存放在4°C,但是使用前,应该先回复到室温。 Wash Solution 2/3可能加入乙醇使用几天后出现沉淀晶体,并不影响使用,直接不吸晶体,吸上清使用就可以。 运输在常温下进行,不影响使用效果。 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。 产品介绍: 近年来对RNA干扰和调节性小RNA的广泛研究迫切需要一种能有效提取15-30核苷酸左右大小RNA(包括siRNA和miRNA)的试剂盒。但是传统的RNA提取方法如硅胶膜不能有效吸附回收,酚/胍抽提和乙醇沉淀并不能有效沉淀回收微小分子RNA,对于血液样本更是由于其自身特点更难提取。本试剂盒采用独特的裂解液迅速直接裂解全血(液体样本)和灭活细胞RNA酶,强烈有机抽提去除蛋白和DNA,RNA包括微小分子RNA吸附于离心柱内特殊硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质进一步去除, 最后低盐的洗脱液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。 产品特点: 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。 也不需要乙醇沉淀等容易丧失微小分子RNA的步骤。 独有的裂解液配方,可直接裂解全血,不需要先裂解去除红细胞。 多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RNAi,RT-PCR,Northern-blot和各种实验。 注意事项: 第一次使用前请先在70%乙醇、Wash Solution 1瓶和Wash Solution 2/3瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入! 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。 需要自备乙醇,氯仿,一次性注射器,研钵。 Lysis buffer 和Wash Solution 1含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。 预防RNase 污染,应注意以下几方面: 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase 污染。 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。 RNA 在裂解液中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时,塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。 配制溶液应使用无RNase 的水。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%( v/v),37℃放置过夜,高压灭菌。) RNA 纯度及浓度检测: 完整性:RNA 可用普通琼脂糖凝胶电

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