生物制品学第七89章部分重点.doc

第七章 基因工程菌苗 目前应用菌苗的类别：按菌苗所含的成份，菌苗可分为九类，即减毒的活菌苗、灭活的死菌苗、纯化的多糖或蛋白成份苗、基因缺失活菌苗、载体重组活菌苗、核酸菌苗、联合重组菌苗、多价菌苗、多糖与蛋白结合菌苗。 理想菌苗的条件：（1）安全，遗传性状稳定，无毒性，无致癌性，无致畸变或致流产性。（2）结构简单清楚，可生物降解，有生物相容性，与组织抗原无免疫学交叉反应。（3）对各年龄组人群均有长时间的免疫保护作用。（4）多价，有更大的覆盖面，最好一次性免疫。（5）能口服，能有效诱导黏膜免疫。（6）易于生产，储存及服务，不需冷藏。 传统菌苗对重要细菌感染性疾病存在的问题：①现有菌苗保护效果不好；②副反应大；③难以培养的细菌；④可诱发癌变，有严重后遗症；⑤新出现的病原体或新变异病原菌。 DNA苗分类：1、裸核酸菌苗2、用减毒???细菌做载体，将重组的DNA转化至载体上，再去转染人或动物细胞 与裸DNA释放相比，用细菌释放DNA的优点： 1）用肌肉注射或基因枪注入DNA只能转染有限的抗原提呈细胞（APCs），而通过适当的细菌释放DNA，能将质粒DNA特异靶向相关免疫组织的APCs，且除APCs外，还可靶向树突状细胞（DCs），以能更好地进行抗原提呈。2）细菌的成份如G-菌的LPS和G+菌的脂肽酸及细菌DNA中没有甲基化的序列等，都有佐剂活性，可增加释放DNA的免疫原性。3）细菌载体还能进行口服，转染肠相关淋巴组织，促进黏膜免疫效果。他们可停留在吞噬泡中，也可通过分泌溶质膜素破泡而进入胞浆。控制抗原提呈的途径及相应的T细胞亚类的效应反应。 用胞内细菌释放DNA系统也存在危险因素：1）入侵性虽然利于DNA释放，也存在毒力回复的危险。2）G-菌的LPS也有毒性问题。3）释放的DNA有整合到宿主细胞基因组的可能。 基因工程菌苗开发战略的几点考虑： 1.创新疫苗的研制，开发和应用 2.对病原体致病与发病机制的认识及宿主抗感染免疫机制的了解 3.黏膜疫苗及黏膜释放途径是创新疫苗研制的重要方向 4.人类重要病原体基因组测序的完成，将为创新疫苗的研制提供新的机会和条件 5.创新疫苗的研制需要不同学科的协作，理论的融合及各类生物技术包括动物模型的合理使用与创建 第八章 基因工程寄生虫疫苗 对寄生虫疫苗研究成功的关键:1、选择免疫应答难以作用的寄生部位； 2、寄生虫在宿主体内不同发育阶段表现抗原特异性改变，从而使获得性免疫力有严格的阶段特异性。3、寄生虫在抗原变异，抗原摹拟和寄生虫摄入宿主DNA和获得宿主蛋白或以宿主抗原伪装自己方面也表现出非常复杂而有效的免疫逃避机制。 寄生虫疫苗的分类：①带低毒活野生型疫苗（自然界中分离的）；②致弱病原疫苗（减毒活疫苗）；③灭活或死病原疫苗；④亚单位疫苗（包括抽提物或代谢产物）；⑤合成的或重组的抗原疫苗；⑥抗独特型Ab疫苗；⑦DNA疫苗。 迄今仍无公认的寄生虫病疫苗，究其原因：（1）多数寄生虫为多细胞生物，寄生虫抗原成分非常复杂，很难找准特定保护性抗原，保护性免疫应答机制不清。（2）寄生虫抗原免疫所诱导的大都为部分保护性免疫力（一般为30%~70%）。（3）寄生虫形成种种逃避宿主免疫应答的办法，其机制尚待阐明。（4）寄生虫一般引起慢性长期感染，病期因寄生虫生活史中形态上不同，常存在数阶段。 疟疾疫苗的分类： 1、抗红前期原虫疫苗：红前期疟疾疫苗又称抗感染疫苗，主要针对疟原虫子孢子或肝内期疟原虫，红前期疫苗通过诱导机体产生特异性抗体，来阻止子孢子入侵肝细胞或诱导机体产生特异性识别感染肝细胞的 T细胞，来杀死感染肝细胞或干扰疟原虫在肝细胞内的发育增殖，阻止其释放出感染性裂殖子，从而达到抗感染的效果。抗红前期原虫疫苗达到100%的保护率才能真正达到保护效果, 因为只要有单个子孢子逃逸就可能引起机体的感染。 2、抗红内期原虫疫苗：红内期疟疾疫苗又称抗病疫苗，其机制一般是阻断裂殖体入侵红细胞或避免感染红细胞黏附于血管内皮细胞。裂殖子表面蛋白和顶端复合体抗原成为疫苗研究的焦点。 3、传播阻断性疫苗：通过阻止疟原虫在蚊虫体内的有性增殖而达到阻断疟疾传播的目的，在这个过程中，虽然不能使个体免于疟疾感染，也不能减轻症状，但能阻断蚊虫将疟原虫从一个宿主传播至另一个宿主 ，传播阻断性疫苗候选抗原主要表达于蚊虫阶段疟原虫表面 ，是当前疟疾疫苗研究的热点。雌雄配子、合子和动合子所表达的表面蛋白是研制传播阻断性疫苗的重要靶抗原。 疟疾疫苗研制的3个阶段：1.第一阶段是减毒疫苗2.第二阶段是亚单位疫苗3.第三阶段是基因疫苗 疟疾疫苗研制所面临的困难和挑战：(1) 缺乏保护作用强的候选抗原。(2)缺乏对疟疾保护性免疫机制的了解。(3) 缺乏有效的动物模型。(4) 缺乏持久的免疫力和难以产生足够高水平的抗体。 血吸虫成虫主要寄生