细菌内毒素检测方法验证的方案.doc

细菌内毒素检测方法验证方案 起 草 人 起草日期 审 核 人 审核日期 批 准 人 批准日期 厦 门 市 鲎 试 剂 实 验 厂 有 限 公 司 细菌内毒素检测方法验证方案 目的-------------------------------------------------------------------------1 范围-------------------------------------------------------------------------1 责任人----------------------------------------------------------------------1 内容-------------------------------------------------------------------------1 1.实验材料及用具-------------------------------------------------------1 2 实验准备----------------------------------------------------------------1 3.具体验证步骤-----------------------------------------------------------2 3.1. 鲎试剂灵敏度复核-------------------------------------------------2 3.2..干扰实验--------------------------------------------------------------4 3.3.供试品细菌内毒素检查---------------------------------------------6 4. 验证结论----------------------------------------------------------------8 附： 表1.鲎试剂灵敏度复核记录 表2. 干扰试验记录 表3.细菌内毒素检查记录 细菌内毒素检测方法验证方案 目的：为确保复方氨基酸注射液(18AA-Ⅲ)细菌内毒素检测方法的专属性、灵敏度，保证检测结果可符合质量标准要求，特制定此方案。 范围：复方氨基酸注射液(18AA-Ⅲ)细菌内毒素检测方法 责任人：细菌内毒素检验员、QC主管 内容： 1.实验材料及用具 1.1. 电子天平 1.2. 电热干燥箱 1.3. 恒温水浴箱 1.4.水银温度计 1.5. 旋涡混合器 1.6. 鲎试剂（具有国家主管部门的批准文号） 1.7.细菌内毒素工作标准品 1.8.细菌内毒素检查用水 1.9. 实验用具:移液管、凝集管、三角瓶、试管、试管架、洗耳球、时钟、75%酒精棉、剪刀、砂轮。 2 实验准备 2.1. 玻璃器皿的洗涤将玻璃器皿放入铬酸洗液或其他热原灭活剂或清洗液中充分浸泡，然后取出将洗液空干，用自来水将残留洗液彻底洗净，再用蒸馏水反复冲洗三遍以上，空干后放入适宜的密闭金属容器中或用锡箔纸包好后再放入金属容器内，放置入烤箱。 2.2. 除去玻璃器皿表面可能存在的外源性内毒素玻璃器皿置烤箱后，将烤箱调至250℃，待烤箱温度升至设定的温度后开始计时，干烤至少1 小时。达到规定时间后，关断电源，待烤箱温度自然降至室温。在不打开金属容器的情况下，可在两天内使用；如果玻璃器皿用锡箔纸包装，在不打开包装的情况下可在两周内使用，否则须再次干烤 除去可能存在的外源性内毒素。 3.具体验证步骤 3.1. 鲎试剂灵敏度复核 3.1.1. 实验操作 3.1.1.1.细菌内毒素标准溶液的制备 取细菌内毒素工作标准品一支，轻弹瓶壁，使粉末落入瓶底，然后用砂轮在瓶颈上部轻轻划痕，75%酒精棉球擦拭后启开，启开过程中应防止玻璃屑落入瓶内。 按照标准品说明书，加入规定量的细菌内毒素检查用水溶解其内容物，用封口膜将瓶口封严，置旋涡混合器上混合15分钟。然后进行稀释，制备成4个浓度的细菌内毒素标准溶液，即2λ、λ、0.5λ、0.25λ（λ为所复核的鲎试对的标示灵敏度），每稀释一步均应在旋涡混合器上混合30 秒钟。 3.1.1.2.待复核鲎试剂的准备 取规格为0.1ml/ 支的鲎试剂18支，轻弹瓶壁，使粉末落入瓶底，用砂轮在瓶颈轻轻划痕，75%酒精棉球擦拭后启开备用，防止玻璃屑落入瓶内。每支加入0.1ml 检查用水溶解，轻轻转动瓶壁，使内容物充分溶解，避免产生气泡。 3.1.1.3.加样 将已充分溶解的待复核鲎试剂18支（管）放在试管架上，排成5列，其中4列4支（管）