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QuantStudio3D数字PCR仪简易操作流程.PDF
QuantStudio3D数字PCR仪简易操作流程
QS3D数字PCR仪简易操作流程
QS3D数字PCR仪简易操作流程
1. 配制反应液
Material Volume (uL) Stock Final
QuantStudio™3DDigitalPCRMasterMix, × 15.0 × 1×
TaqManAssay,20×(primer/probemix) 1.5 20× 1×
DilutedDNA 3.0 10ng/uL 1ng/uL
Water 10.5
Totalvolume(for1sample/ chips) 30.0
2. 芯片上样准备
2.1按照下图所示,安装紫外交联剂注射器 (注意避光操作):
2.2 按照下图所示,安装封油注射器 (一个小时之内使用):
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2.3 按照下图所示,正确放置芯片、刷头及芯片盖。
1 2
○○
放置芯片:按照下图 顺序,将芯片按照缺口方向放置于芯片槽中
1 2
放置刷头:按照下图○○顺序,将刷头安装于chiploader上
1 2
○○ chiploader
放置芯片盖:按照下图 顺序,将芯片盖安装于 上
3. 上样
3.1取14.5 uL的反应液,加入刷头下部的加样孔。
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3.2 按压黑色loading按钮,Chiploader会将刷头内的反应液均匀涂抹在芯片上。涂抹的
过程中,仪器绿色指示灯闪烁,涂抹完毕后,指示灯变成常亮。
3.3 样品涂抹完毕后,如下图所示悬空加上10-15滴的封油,封油正好覆盖芯片表面。
3.4 将chiploader臂翻转过来,使得芯片盖接触到芯片,紧密的按压至少15秒后,按压
LidNest按钮,将chiploader臂放回原位。
3.5 将芯片取出,再次注射封油。注射器与芯片成45度角,缓慢推动注射器,将封油从
注射孔中注入芯片,注意不能引入气泡。若有油渗出,可用无尘纸擦拭干净。
3.6 将紫外交联剂的注射器插入芯片注射孔中,缓慢注射紫外交联剂,直到液体触碰到芯
片,将注射器拔出,将注射口用交联剂封住。
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3.7 将芯片插入chiploader上的UVcuringstation, 插入后指示灯亮起,大约15秒,待
灯灭后取出芯片。
4.PCR
PCR仪:Proflex 2xFlatPCRSystem
DualFlatBlockGeneAmpPCRSystem9700
Proflex程序:
9700程序:
1.
2.
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5.芯片结果
5.1 将反应完成后的芯片放入QS3D仪器中,仪器会自动读取ChipID。待ID正常
显示后,点击 “startrun”。
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5.2 芯片读取中,会显示实时状态。
5.3 读取结束后,仪器自动分析结果。出现下图界面时,可以取出芯片,放入下
一张芯片进行读取。
5.4 结果
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6. Qua
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