介绍植物根尖细胞装片制作的一种方法.doc

 PAGE \* MERGEFORMAT 2 介绍“植物根尖细胞装片制作”的一种方法── “一片式”操作法 福建省莆田第六中学　黄玉贤 人教版教科书高中《生物》必修一有个实验《观察根尖分生组织细胞的有丝分裂》和必修二中有个实验《低温诱导植物染色体数目的变化》，这两个实验中都有一个很关键的实验操作步骤，即植物根尖细胞装片的制作。通常，学生们按照教科书中介绍的根尖装片制作要领进行操作，大多数学生所制作的装片，在显微镜下观察实验效果是不太理想的。为此，笔者通过对该装片制作的方法进行了改进，成就了一种好方法──“一片式”操作法来完成根尖细胞装片制作的全流程。 一、 根尖细胞装片制作的“一片式”操作法的方法步骤 （一） 压片 剪取长度约为4～5㎜的植物根尖，放在载玻片的中央上，盖上另一片载玻片，用左手的手指固定住这2片载玻片，用右手的拇指???压载玻片，将根尖压扁，并用镊子柄端对着根尖的尖端（分生区部位）轻轻地敲击数下，然后，拿去上面的一片载玻片。 （二） 解离 对着已被压成扁平状的根尖，加1～2滴质量分数为15%盐酸和体积分数为95%酒精的混合液(1 : 1)，在室温下解离，解离时间约为3min。 （三） 漂洗 用吸水纸吸去多余的解离液，然后加2滴清水，漂洗时间约为2 min。 （四） 染色 用吸水纸吸去清水，然后加一滴质量浓度为0．005g / mL的龙胆紫溶液。染色时间约为1min （五） 去浮色 用吸水纸吸去多余的染液，然后加2滴体积分数为50%的酒精，洗去浮色的时间约为1min。 （六） 制片 用吸水纸吸去多余的酒精溶液，然后加一滴清水,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片． 然后用左手的手指将上下两片载玻片固定住；用右手拇指的指甲对着根尖的尖端轻轻敲击，边操作边用眼睛观察，直到根尖细胞均匀地扩散成云雾状的薄层，拿去上面的载玻片，根尖细胞装片制作即告完成。 二、“一片式”操作法的优点 “一片式”操作法与原方法的对比，具有一些良好的优点。 （一） 实验仪器因陋就简。 原方法操作中的实验仪器需要用3个培养皿，根尖要在第一个培养皿里解离，要在第二个培养皿里漂洗，要在第三个培养皿里染色。而新方法操作中不需要培养皿，根尖从始至终都是在同一片载玻片上进行操作着，并完成根尖装片制作的所有流程，能做到了实验仪器的因陋就简，实验操作的简便快捷。 （二） 实验药品的使用量大大减少。原方法操作中每个实验小组的解离液和染色液的使用量都在1ml以上，而新方法操作中每个实验小组的解离液、染色液的使用量只需要1～2滴就可以，从而节约了大量的实验药品，做到了低成本高效率地进行实验教学。特别是解离液中所含的质量分数为15%的盐酸的使用量，由高使用量减少到极少的使用量，实践了实验药品要安全使用的新课程理念。 （一） 实验效果大大提高。 原方法操作中，学生们要完成根尖装片制作的时间一般都在二十几分钟以上，实验结果也不太理想，实验成功率低。而新方法操作中，学生们要完成根尖装片制作的时间一般是十几分钟就足够了，实验效果良好，实验成功率高，所以整个实验效果也就大大提高了。 三、 新方法实验操作的相关说明 （一） 剪取植物根尖的时间，应该是根尖细胞在一天之中有丝分裂最活跃的时间。如洋葱根尖的取材时间是上午10时至下午2时，尤其是以上午11时30分左右为最佳的取材时间。如果实验课的时间与根尖细胞有丝分裂活跃的时间不一致时，可以在根尖细胞有丝分裂活跃的时间内将根尖剪取下来，接着用固定液固定。当上实验课时再把根尖分发给学生们做实验。 （二） 剪取根尖的长度是以4～5㎜为宜。 教材上叙述是：剪取根尖2～3㎜。这样不妥。因为根尖过短操作起来有许多不方便，甚至会发生根尖丢失的现象，而长度为4～5㎜的根尖的装片制作、操作较容易，既不会影响到分生区细胞有丝分裂的观察，又可以在显微镜下观察到伸长区和根毛区细胞，这有利于对比观察根尖的四种组织细胞。 （三） 染色剂龙胆紫溶液的质量浓度应该以0．005g/ml为宜，而浓度为0．01g/ml或0．02g/ml的龙胆紫溶液易使根尖细胞染色过深，从而影响有丝分裂的各种现象的观察。 经过实践证明，根尖细胞装片制作的“一片式”操作法有多利而无一害。因此，笔者建议人教版教科书高中《生物》必修一中的实验《观察根尖分生组织细胞的有丝分裂》和必修二中的实验《低温诱导植物染色体数目的变化》，这两个实验中有关根尖细胞装片制作的方法步骤应该采用“一片式”操作法来进行实验教学。