南京大学 分子生物学 课件 第21讲.ppt

3，S21-引发酶-σ亚基操纵元mRNA二级结构对基因寿命的影响（图8-18） （1） S21-引发酶-σ亚基操纵元结构（P304） （2）引发酶部分mRNA的降解 （3） S21基因和σ亚基编码区的mRNA的降解;三、蛋白质合成的自体调控 1， RF2对自身mRNA翻译的控制 （1）RF2 mRNA结构 （2）RF2mRNA的翻译 （3）移框窗口;2，核糖体蛋白质合成的自体调控 （1） E coli基因表达机构的蛋白质及其基因的操纵元 A，蛋白质种类 B，操纵元数目 C，操纵元中不同基因表达的差异性;（2）核糖体蛋白质合成的自体调控 A，有自体调控作用的核糖体蛋白的特点 B，核糖体蛋白质合成的自体调控作用（图8－33） C，同一个操纵元中不同基因的表达调控;四、严谨反应 （一）严谨反应 1，定义 2，生理变化;（二）严谨反应的触发器及报警信号 1，触发器 2，报警信号 3，严谨反应相关的基因 4，报警信号的作用机制;第八节 DNA序列重排对基因转录的调控;二、决定沙门氏菌相的因素 1，H1，H2基因的位置 2，H2－rh1转录单元的作用（图8－36） （1）H2－rh1转录单元 （2）rh1基因产物 （3）H2－rh1转录单元的表达对相的影响;3， H2－rh1转录单元的表达调控（图8－37） （1） 995bp的可倒位序列 （2） hin基因产物的功能 三、相变的生物学意义;第九章 真核生物基因表达的调控;第一节 概述;一、真核生物基因调控的特点 1，基因及染色体DNA的特点 2，真核生物基因表达有多层次的调控 （1）DNA水平的调控 （2）转录水平的调控 （3）转录后水平的调控 （4）翻译水平的调控 3，基因表达随细胞类型、发育阶段和环境的变化而异;二、活跃基因表达数目的估算 1， RNA饱和杂交试验原理 2，例子;三、基因表达的不同水平：丰富mRNA和稀少mRNA （一） mRNA复杂度的测定：RNA驱动的动力学杂交试验分析 1，基本步骤（图9－2）;2， mRNA复杂长度的计算;3，例子：鸡输卵管mRNA驱动的动力学杂交试验 （1）对照：鸡卵清蛋白mRNA Rot1/2：0.0008 长度：2000;（2）鸡输卵管中各mRNA组分的复杂长度 组分Ⅰ 组分II 组分III Rot1/2 0.0015 0.04 30 比例 50% 15% 35% 实际Rot1/2 0.00075 0.006 10.5 复杂长度（nt） 2000 15000 mRNA种类 1 7-8 13000 ;（二）mRNA丰富度的计算 1，计算公式;2，丰富mRNA和稀少mRNA（复杂mRNA） （1）丰富mRNA（优势mRNA）：细胞中少数几种高丰度（数千至数万拷贝）的mRNA （2）稀少mRNA（复杂mRNA）：细胞中占mRNA种类绝大多数（数千至上万种）的低丰度（大多在10拷贝以下）的mRNA;四、持家基因和奢侈基因 （一）确定组织特异活跃基因数目的方法 1，加性饱和杂交试验 （1）通过饱和杂交试验分别确定2种不同组织中各自活跃基因表达的数目;如：鸡肝脏mRNA由2.05%的非重复DNA编码（17000个），输卵管mRNA由1.8%的非重复DNA编码（ 15000个） （2）通过饱和杂交试验确定2种组织中活跃基因表达的总数 如：鸡肝脏和输卵管的mRNA由2.4 %的非重复DNA编码;（3）确定2种组织各自特异表达及共同表达的基因 如：鸡肝脏特异的mRNA数目为：17000×（2.4-1.8) / 2.05 ≈5000 输卵管特异的mRNA数目为：15000×（2.4-2.05) / 1.8 ≈3000;2，另一种测定不同组织中活性基因重叠情况的方法 （1）过量的第一种组织mRNA与非重复DNA的杂交试验 分离mDNA（能与第一种组织mRNA杂交的非重复DNA） 分离无效DNA（不能与第一种组织mRNA杂交的非重复DNA，null DNA）;（2）过量的第二种组织mRNA与mDNA的杂交 确定两种组织共有的基因（能与第一种组织mRNA杂交的mDNA ）;（3）过量的第二种组织mRNA与无效DNA的杂交 确定第二种组织不同于第一种组织的基因（能与第二种组织mRNA杂交的无效DNA ）;（二）持家基因和奢侈基因 1，持家基因（house keeping genes) 约占某一类型细胞总mRNA的90％ 约有10000种;2，奢侈基因 (luxury genes) 约占某一类型细胞总mRNA的10％ 各种类型细胞中共有约10