裸鼠成瘤是.ppt

威斯腾生物技术中心 2014-9-1 ;; 裸鼠;裸小鼠(基因符号nu): 无毛(hair less),无胸腺(athymus).幼鼠(3－4周龄),成年鼠(6－8周龄。 抵抗力差，易在SPF环境下可生存，所用的笼具、垫料、饲料、 饮水患病毒性肝炎和肺炎，因而饲养和繁殖要求条件比较严格，等都要求经过严密灭菌消毒并采用隔离器饲养，以保证长期存活并进行繁殖。 裸大鼠(基因符号rnu )： 一般特征似裸小鼠，但躯干部仍有稀少被毛并非象裸小鼠那样完全无毛，头部及四肢毛更多。裸大鼠易患呼吸道疾病。 ; 虽然说以裸大鼠代替裸小鼠，具有移植肿瘤大，取血量多，可行某些外科小手术等优点。因此比裸小鼠有一定优越性，其缺点是维持经费比裸SPF小鼠更高，另外裸大鼠目前不怎么流行。所以我们实验室常用的是BALB/c-nu裸小鼠。 随着裸小鼠年龄增长或有关因素的影响(如病毒感染),裸鼠体内正常T细胞会增加，故接种肿瘤实验一般采用4--6周龄的裸鼠。;;;常规较容易成瘤的细胞： Hep-G2（肝癌，Hep2（喉癌），NCI-H460(大细胞肺)，A431(表皮癌),SK-OV-3（卵巢癌），MCF-7（乳腺癌），A375/B16-F10（人黑色素瘤细胞）。;1、慢病毒保存 理论上慢病毒可在-80℃保存6个月，在4℃可保存3天。因为 慢病毒每次冻融会降低病毒滴度10%，因此慢病毒实验最好 是提前分装。 2、MOI值 细胞感染达到80%以上所需MOI值，这个大部分细胞是可以 查到，不过因为因为慢病毒感染细胞是很灵活的，因此MOI 值的选择也是很有差异性的，具体情况具体分析。;附：慢病毒使用量的相关计算公式;附：一些细胞的慢病毒感染效果图 K562 A549;细胞培养： 细胞的状态以及数量是裸鼠皮下成瘤很关键的一步。细胞状态良好，对数生长期，接种很容易形成肿瘤，反之则会导致失败。即浪费了细胞，又错过了裸鼠成瘤的最佳时期;裸鼠成瘤;附：我们实验一些裸鼠成瘤的成功案例;裸鼠皮下成瘤后，除了一些常规的检测外 我们一般可进行以下一些实验操作：;1、裸鼠的品系。 2、裸鼠成瘤用的材料：细胞的选择。 3、客户的具体要求：比如说肿瘤形成部位，是否需要详细记录肿瘤的大小变化，是否需要取材后需要怎么??摄裸鼠的照片等等。;谢谢大家！