阎-实验六-生理生化是.ppt

（一 ）化学因素对微生物生长的影响 （二）细菌的生理生化反应;实验目的： 了解常用化学消毒剂对微生物的作用 ;实验原理： 1 氧化剂：通过强烈的氧化作用杀死微生物。 碘的杀菌力强，3－7％碘溶于70－83％的乙醇中 成碘酒。 2 重金属盐类：使蛋白质变性、沉淀，使酶失活。 0·02－0·2％HgCl2（升汞）溶液对大多数细菌有致死作用。 ;3 有机溶剂：使蛋白质及核酸变性、破坏细胞膜透性，抑制脱氢酶，氧化酶活性。 乙醇（70%） 4 表面活性剂：具有降低表面张力效应的物质，可抑菌或杀菌。 甲酚杀菌力最强 煤酚皂液（来苏尔）为甲酚和肥皂的混合液。 新洁尔灭：破坏细胞的渗透性;实验材料;实验步骤;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;实验结果;实验二：细菌的生理生化反应 （IMViC 与硫化氢试验） 吲哚（I）、甲基红（M）、V.P.试验（Vi）、柠檬酸盐利用（C）试验。用以将大肠杆菌与其形状十分相近的肠杆菌属的细菌鉴别开来。 实验目的： 1 学习几种主要微生物的生理代谢试验及检验方法 认识微生物代谢类型的多样性。 2 了解IMViC反应在肠道菌鉴定中的意义和方法 ;实验原理： 1 吲哚试验 ： 用来检测吲哚的产生，有些细菌能产生色氨酸酶，分解蛋白胨中的色氨酸产生吲哚和丙氨酸。 吲哚 + 对二甲基氨基苯甲醛 红色的玫瑰吲哚;2 甲基红试验（M.R） ： 大肠杆菌与产气肠杆菌在利用葡萄糖进行发酵时，前者可产生大量的混合酸，使pH﹤4.5；后者则产生大量的中性化合物丁二醇，pH﹥4.5，因此在发酵液中加入甲基红试剂时，前者呈红色，后者呈黄色。; 葡萄糖 乳酸 丙酮酸 乙醛 乙酰CoA 甲酸 乙醇 ?乙酰乳酸 二乙酰 3-羟基丁酮 2,3-丁二醇;葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇 →二乙酰→红色化合物 + 胍基化合物 葡萄糖→丙酮酸 ;4 柠檬酸盐利用试验：;I M Vi C试验;5 硫化氢试验：;实验材料;实验步骤;2、学生按实验书所介绍的操作方法进行生化反应试验，将实验 结果填入下表中（六人一组结果共享） ;▲硫化氢试验 培养24h后观察黑色硫化铁的产生。 ▲吲哚试验　 在培养24h后的蛋白胨水培养基中加入3--4滴乙醚，摇动数次，静置1--3min，待乙醚上升后，沿试管徐徐加入2滴吲哚试剂，在乙醚和培养物之间产生红色环状物为阳性反应。 ▲甲基红试验　 在培养24h后的葡萄糖蛋白胨水培养基内加入甲基红试剂2滴，培养基变红者为阳性，变黄者为阴性。（注意：甲基红试剂加得过多，可出现假阳性现象。） ▲伏－普试验 在培养24h后的葡萄糖蛋白胨水培养基内加入5－10滴40％KOH，然后加入等量的5％α-萘酚溶液，用力振荡，再放入37℃温箱中保温15－30分钟。反应物呈红色者，为伏－普反应阳性。 ▲培养48h后观察柠檬酸盐斜面培养基上是否有细菌生长和是否变色，蓝色为阳性，绿色为阴性。 ;实验要求