三种脱钙液对的骨组织脱钙后切片染色效果分析.pdf

武警医学 ( Medical Journal of the Chinese People# s Armed Police Forces) Vol. 19 No. 10 2008- 10 出版 937 三种脱钙液对骨组织脱钙后切片染色效果分析 连丽琴 夏凌志 钟惠霞 ( 武警广东边防总队医院检验病理科, 深圳 518029) 关键词 脱钙处理 骨组织 组织切片 中国图书分类号 R361+ . 2 在病理工作中, 骨组织的脱钙 处理是一 大技术难题。 骨 标有时间的装有 PLANK 脱 钙液 的杯 中, 分 别脱 钙 14、17、24 组织是一种坚硬的结缔组织, 由细胞 、基质 和纤维组 成, 纤 维 h。然后进行常规制片。 是和胶原纤维一样的骨胶原纤维, 其 基质含大量 固定的无 机 1. 2. 2. 2 10% 甲 醛+ 5% 硝 酸组 将 ??好 材的 骨组 织放 进 盐。骨组织内共有骨母细胞、骨细胞、破骨细胞 三种细胞, 要 三个装 有脱 钙液 的小 杯中 分别 脱钙, 在 14、17、24 h 后 拿 进 顺利制出一张质量较好的组织切片并非易 事, 基 本要求是 切 37 ? 的烤箱加温 40 min, 再 把脱钙的 组织浸 入自来 水中冲 洗 片完整, 染色后各种 骨细 胞的细 胞核 及胞 浆清晰, 细 胞外 胶 3 h, 然后 按常规操作进行制片。 原对比度好。目前使用的脱钙方法有很多 种, 可 以分为酸 类 1. 2. 2. 3 EDTA 组 将 骨组织放 入盛有 10% EDTA 脱钙 液的 脱钙液、螯合剂脱钙液、电解法脱钙液等。 小烧杯中, 加盖, 将此小烧杯放入盛有 400 ml 自来水的大烧杯 中, 再将此烧杯放在微波炉的大转盘上, 微波设 置在 160 W 左 1 材料和方法 右, 辐射 5 min, 测量脱钙液的温度( 60? ) , 间隙 3 min。用同 1. 1 材料 样的方法辐射 5 次( 每 次更换大小 烧杯中的 溶液) 后, 以 大头 1. 1. 1 标本 标本来自武警广东边 防总队医院 骨科送检 的 针能够刺进骨组织为脱钙完成标准, 然后常规石蜡制片。 骨组织, 经 10% 甲醛固 定, 用手 术器 械将 骨组 织切 成大 小 1 2 结 果 cm! 1 cm! 0. 3 cm 的骨块。 1. 1. 2 试剂 及配 方 ( 1) PLANK 脱 钙液: 饱和 氯化 铝溶 液 不同时间段及不同脱钙液脱钙效果( 图 1~ 6, 见封三) 。 200 ml, 盐酸 8. 5 ml, 甲 酸 5 ml; ( 2) 10% 甲 醛 + 5% 硝酸 液: 骨组织在 PLANK 脱 钙液和硝酸 甲醛液 中不同 时间下 脱 40%甲 醛, 65% 硝酸, 100