临床免疫学检的验 名词解释重要知识点 (下).doc

外周血单个核细胞（PBMCs）：包括淋巴细胞和单核细胞，其比重在1.075~1.090，而红细胞和多核白细胞比重在1.092左右。分离淋巴细胞以密度1.077±0.001的分层液为佳。 Ficoll分离液法主要用于分离PBMCs，是一种单次差速密度梯度离心法。聚蔗糖-泛影葡胺是一种较理想的细胞分层液，商品名Ficoll。分离时先将分层液置试管底层，然后将肝素抗凝全血以Hanks液或PBS液做适当稀释后，轻轻叠加在分层液的上面，使两者形成一个清晰的界面。水平式离心后，离心管中会出现几个不同层次的液体和细胞带： 由于红细胞和粒细胞比重大于分层液，同时因红细胞在Ficoll液中凝聚成串而沉于管底，血小板则因密度小而悬浮于血浆中，只有与分层液密度相当的单个核细胞密集在血浆层和分层液的界面之中，呈白膜状为白膜层。吸取该层细胞，经洗涤离心重悬即为单个核细胞。本法分离单个核细胞纯度可达95%，淋巴细胞约占90~95 %，细胞收率可达80%以上，但室温超过25℃时可影响细胞收率。 辅助性T细胞的典型表面标志：CD3+CD4+CD8+。（Th1主要分泌IL-2，IFN-γ或TNF-β等辅助细胞免疫或参与迟发型超敏反应；Th2主要分泌IL-4/5/6/10等辅助体液免疫、参与速发型超敏反应） 细胞毒性T细胞的典型表面标志是CD3+CD4-CD8+。（CD3+CD8+CD30-可认定为Tc1细胞；CD3+CD8+CD30+可认定为Tc2） 调节性T细胞：自然存在的，其典型标志为CD4+CD25+Foxp3+ （最重要的分子标记是一种转录因子Foxp3） 成熟B细胞均表达CD19，B1细胞CD19+CD5+，B2细胞CD19+CD5- NK细胞的典型标志：CD3-CD16+CD56+。单核-巨噬细胞的典型表面标志为CD14。人成熟DC的主要特征表面标志为CD1a、CD11c和CD83，但不表达MPS、T/B/NK细胞的典型表面标志（CD14/3/19和CD20/16/56）。 T细胞增殖试验有：形态学检查法，3H-TdR掺入法、MTT比色法 溶血空斑实验（PFC）：将经SRBC免疫过的小鼠脾细胞与一定量的SRBC混合，在补体参与下，使抗体形成细胞周围那些受到抗体分子致敏的绵羊红细胞溶解，形成肉眼可见的溶血空斑，每一个空斑中央含一个抗体形成细胞，空斑数目即为抗体形成细胞数目。 细胞因子（CK）：是由机体活化的免疫细胞及某些基质细胞分泌的小分子蛋白质，通过结合细胞表面的相应受体发挥生物学效应（有旁分泌、自分泌、内分泌）。 细胞粘附分子（CAM）：是由细胞产生、介导细胞与细胞间或细胞与基质间相互接触和结合的分子。 酶联免疫斑点实验（ELISPOT）：在包被有待测CK抗体的微孔板上，加入可分泌相应细胞因子的待测细胞，在有或无刺激物存在的条件下培养后，待测细胞向其周围分泌细胞因子，并被板上的特异性抗体捕获。洗去细胞后用酶标抗体为一抗或二抗，分别做直接法和间接法。 所选底物应在酶促反应后形成不溶性产物。一个斑点代表一个细胞因子分泌细胞，斑点的颜色深浅程度与细胞因子量相关。 免疫球蛋白(Ig)：是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。可分为分泌型和膜型两类。（现在认为，Ig与Ab没有什么区别）临床上常用速率散射免疫比浊法检测Ig。 选择性蛋白尿指数（SPI）： SPI＜0.2为选择性蛋白尿， 肾小球损害较轻（如微小病变肾病），治疗反应和预后大多较好； SPI＞0.2为非选择性蛋白尿， 肾小球损害较重（如膜性肾病、膜增殖性肾炎与肾病综合征），预后大多不良。 M蛋白（MP）：是B淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖所产生的一种在氨基酸组成及顺序上十分均一的异常单克隆Ig。 本周蛋白：即尿液中游离的免疫球蛋白轻链。 补体：是存在于人和动物血清、组织液和某些细胞膜上的一组经激活后具有酶活性的、不耐热的蛋白质。 血液中大部分补体由肝脏合成，均为糖蛋白，多为β球蛋白，少数为α/γ球蛋白；其中C3含量最高（1.2g/L），D因子含量最低（1~2mg/L）。补体应保存于-20℃以下（56℃加热30min即可灭火，常温下很快失活） ?经典途径MBL途径旁路途径激活物质抗原抗体复合物MBL相关丝氨酸蛋白酶肽聚糖、酵母多糖、脂多糖起始分子C1qC2、C4C3参与成分C1、C4、C2、C3C4、C2、C3、MASPC3、B因子、D因子共同末端C5~C9C5~C9C5~C9所需离子Ca2+，Mg2+Ca2+Mg2+C3转化酶C4b2bC4b2bC3bBb（p）C5转化酶C4b2b3bC4b2b3bC3bnBb（p）是否依赖Ab是否否生物学作用参与特异性免疫的效应阶段，于感染后期发挥作用参与非特异