亲和-超滤载痰腻对His标记重组AxCeSD吸附特性的研究.pdf

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2015, Vol.31, No.5 亲和-超滤载体对 His 标记重组 AxCeSD 吸附特性 的研究 刘光毅，刘光，陈萍，李琳，胡松青 （华南理工大学轻工与食品学院，华南理工大学淀粉与植物蛋白深加工教育部工程研究中心，广东省天然产物绿 色加工与产品安全重点实验室，广东广州 510640） 摘要：采用金属螯合亲和层析技术纯化了 N-末端组氨酸(His)标记的重组蛋白 AxCeSD。以 2000 ku 的水溶性葡聚糖 DextranT2000 为基质，亚氨基二乙酸(IDA)作为螯合剂，Cu2+做亲和配基制备了能特异性吸附重组蛋白 His 标记的水溶性葡聚糖亲和-超滤载体，并 探讨了 pH、离子浓度、吸附时间以及温度等因素对水溶性葡聚糖亲和-超滤载体吸附重组蛋白 AxCeSD 的影响。结果表明，在一定范 围内，随着 pH 和温度的升高亲和-超滤载体对 AxCeSD 吸附量增加，而随着离子浓度的增加其对 AxCeSD 吸附量减少；亲和-超滤载 体对 AxCeSD 的吸附在 30 min 内能够达到平衡。应用 Langmuir 方程拟合了等温条件下亲和-超滤载体对 AxCeSD 的吸附曲线，得到 最大理论吸附量为 125.15 mg/g，解离常数为 3.259×10-6 mol/L，说明亲和-超滤载体对 His 标记的重组 AxCeSD 的吸附为以螯合作用为 主的特异性吸附。 关键词：亲和-超滤载体；葡聚糖；重组蛋白 AxCeSD 文章篇号：1673-9078(2015)5-65-70 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2015.5.011 Adsorption Characteristics of Affinity-ultrafiltration Escort to His-tagged Recombinant AxCeSD LIU Guang-yi, LIU Guang, CHEN Ping, LI Lin, HU Song-qing (College of Light Industry and Food Sciences, South China University of Technology; Starch And Vegetable Protein Processing Engineering Research Center of The Ministry of Education of South China University of Technology, Guangdong Key Laboratories on Green Natural Products Processing and Product Safety, Guangzhou 510640, China) Abstract: N-terminal histidine (His)6-tagged rec