体外分析的.ppt

体外放射分析法;类型;放射免疫分析;放射免疫分析标准曲线常用的三种作图法;二、RIA;放射免疫分析技术所用抗体质量的三种主要指标;（1）亲和力（2）交叉反应（3）滴度检测：;3、标准品或校准试剂：;（1）液相分离剂： a、双抗体沉淀法； b、PEG沉淀法； c、葡萄球菌A蛋白（SPA）沉淀法； d、活性炭吸附法：测上清液 e、微孔滤膜过滤法 f、其它：如盐析法、层析法、电泳法等;（2）固相分离剂： 材 料：如塑料、纤维等，凝胶颗粒等 具备条件： a、吸附牢固； b、不影响抗体免疫活性； c、NSB低； d、吸附材料的理化性质稳定； e、吸附材料价廉易得；;三、测定方法;四、评估RIA试剂盒的 主要技术指标;3、精密度： 同一样品重复测定的实测剂量的离散程度 CV=SD/均数×100% 批内＜10%； 批间＜15%ABCV： 一批试验的 平均CV（为各样品CV的平均值; 如两批样品的含量一高一低，ABCV就缺乏可比性，就必须作精密度图：;4、特异性： 主要指抗体的特异性5、非特异结合率： PEG＜10% 双抗或固相＜5%6、剂量-反应曲线和工作范围：;改变抗体滴度对标准曲线不同区段斜率（A）及精密度图（B）的影响;五、RIA的质控;2、内容： 试验误差：随机误差和系统误差 （1）标准曲线质量； （2）精密度检验； （3）整批试验的偏差； （4）漂移； （5）批间质控；;精密度、偏差和准确度三者关系示意图;Schewart图;其他放射免疫分析;免疫放射分析;二、IRMA的特点： ;三、IRMA的试剂： ;四、IRMA的基本方法： ;五、IRMA的实际应用中的特点： ;4、可测量的剂量范围宽；;五、IRMA的不足之处： ;非放射性标记免疫分析;一、酶标记免疫分析法：;1、酶联免疫吸附分析法（ELISA）;2、酶免疫荧光分析法;二、发光免疫分析法：;1、化学发光免疫分析法（CLIA）;固相Ab1——待测Ag——化???发光物质标记Ab;2、酶增强发光免疫分析法（ECLEA）;以DPC公司为例：;3、电化学发光免疫分析法（ECLIA）;三、荧光免疫分析法：;RIA与化学发光的比较;受体放射配基结合分析;1、饱和曲线： 2、竞争抑制曲线： 若受体和放射性配基的结合反应系统中另加入该受体的非标记配基，则后者会与放射性配基竞争受体;一、基本条件：;3、非标记配基： （1）测NSB； （2）竞争结合反应中作为竞争剂； 4、结合反应类型： （1）多点饱和曲线； （2）单点法； 5、反应的环境条件： （1）PH、Buffer； （2）温育温度和时间； （3）反应体积； 6、分离结合和游离部分：;临床意义：;3、心血管系统： 肾素、血管紧张素、醛固酮、胆红蛋白、心肌钙蛋白、地高辛、心纳素、内皮素…… 4、肿瘤标志物： AFP、CEA、Ca50、Ca199、Ca125、Ca153、Ca724、PSA、FPSA、Ca211、NSE、Scc、TPS、TSGF、……;要点：;二、技师：