双向电泳技术的原理及其应用.pdf

2 2 2 2 1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 第 22 卷第 2 期 国外医学·生理 、病理科学与临床分册 Vol. 22 　No. 2 　　　　　　　　　 2002 年 4 月 Foreign Medical Sciences · Section of Pathophysiology and Clinical Medicine Apr. 　2002 ① 双向电泳技术原理及其应用 刘上峰 　傅俊江 　综述 　　李麓芸 　审校 (中南大学湘雅医学院人类生殖工程研究室 ,湖南 长沙 410078) 摘要 : 双向电泳技术是蛋白质组研究的核心技术之一 ,本文对其基本原理 、分辨率 、可重复性 、相关数据库 、减法 分析等作了介绍 ,并对其今后的发展方向作了展望 。 关键词 : 双向电泳 ; 　蛋白质组 ; 　数据库 ; 　减法分析 中图分类号2: R3182 33 　　文献标识码2 2 : A 　　文章编号 : 1001 1773(2002) 02 0197 03 2 　　随着后基因组时代的到来 ,蛋白质组学应运而 点[2 ] ,一般的 2 DE 能分辨 1000～3000 个蛋白质点。 生。双向电泳 (two dimensional electrophoresis ,2 DE) 常用改善分辨率的主要措施有 :应用复杂的两 作为蛋白质组研究的三大关键核心技术之一 (另二 性电解质 ,减少凝胶厚度 (1. 5～0. 5 mm) 以及增大凝 种是质谱技术和计算机图像数据处理与蛋白质组数 胶面积 (30cm～40cm) 。Humphery Smith 等[3 ] 创立了 据库即蛋白质组信息学) ,仍然是目前分析组份复杂 蛋白质组重叠群 (proteomic contig) 来提高分辨率 ,即 蛋白质分辨率最高的工具 ,因此日益受到人们的广 利用多块不同 pH 梯度和/ 或分子量上相互重叠的双 泛关注。 向电泳图谱 ,拼接成一张完整的双向电泳图谱。但 1 　双向电泳的基本原理 因细胞内含有 3～5 万种蛋白质 ,远远不能满足需 首先根据蛋白质等电点不同