实验2、 LB培的养基制备及大肠杆菌的接种.ppt

实验二　LB培养基制备及 大肠杆菌的接种;一、 实验目的;二.、实验原理;三.、实验器材; 特点：DH5α是一种经诱变的菌株；缺乏DNA 修饰，即其自身DNA不会被修饰；缺乏“免疫”机制，不会对导入的外源DNA进行切割；对青霉素敏感。 用途：基因工程受体菌。; 2、LB培养基 　是微生物学实验中最常用的培养基，用于培养大肠杆菌等细菌，其分为液态或是加入琼脂制成的固态培养基。加入抗生素的 LB 培养基可用于筛选以大肠杆菌为宿主的克隆。 　　 LB培养基的配方如下： 酵母提取物：5 g 蛋白胨： 10 g NaCl： 10 g 琼脂： 15～20 g 水： 1000 mL pH 7.0　;四、实验方法;培养基灭菌; 取菌种前灼烧接种环，消灭接种环上的微生物，冷却； 用接种针挑取单菌落，迅速送入培养皿内，培养基的一边划Z线。划线??，接种针应与平板表面成30°角左右。不要使接种针碰到培养皿边缘，也不要将培养基划破； 灼烧接种环，待接种环冷却后，转动培养皿约70°角，用烧过冷却的接种针，通过第1次划线部分作第2次划线； 灼烧接种环，待接种环冷却后，用同样方法，通过第二次划线部分作第三次划线和通过第三次划线部分作第四次划线； 划线完毕后，盖上皿盖，以封口条将培养皿封好，标注日期； 灼烧接种环； 培养皿倒置于恒温箱培养。 ;;六、实验结果;七、注意事项;八、思考题;Thank you!