实验1大肠杆镜您的培养和分离.ppt

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实验1大肠杆镜您的培养和分离

实验1: 大肠杆菌的培养和分离;微生物包括哪五类:;大肠杆菌(E.coli);细菌的代谢类型 ;大肠杆菌;芽孢;一、基础知识:;液体培养基:;固体培养基:菌落,菌苔;半固体培养基:;选择培养基;天然培养基有血清、血浆、和组织提取液(如鸡胚和牛胚浸液)。 优点:营养成分丰富,培养效果好 缺点:来源受限;成分复杂,影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染;;血清中含有: ①多种蛋白质(白蛋白、球蛋白、铁蛋白等) ②多种金属离子; ③激素; ④促贴附物质,如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。 ⑤各种生长因子 ⑥转移蛋白 ⑦不明成分;培养基的用途;不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方;1.无菌操作的概念 ;比较消毒与灭菌;高压蒸汽灭菌 (湿热灭菌) 洒精灯灼烧灭菌 干热灭菌;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法:70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 ……;请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。 如果需要,请选择合适的方法。 (1) 培养细菌用的培养基与培养皿 (2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管 (3) 实验操作者的双手;(一)制备LB培养基(通用的细菌培养基); ①分装:注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,因此在将培养基转移到三角瓶或试管中时必须用__________。 ②加塞:试管用塑料盖或________;三角瓶口用_______或_________封口,再用_________或报纸封口。 ③包扎:用________或报纸;3)加热排气: ; 倒平板:待培养基冷却至_____ ℃时,将每只培养皿倒入_________ml未凝固的固体培养基,置于_____位置上,轻轻晃动使其均匀铺满平皿底部,待凝,使之形成平面。_______备用。 制斜面:将未凝固的固体培养 基的试管____放,冷却待凝使即 成为斜面。;思考题: A、操作过程中避免带入杂菌的方法有哪些? 1、灭菌后的培养基、器具置于超净台上,并打 开超净台的紫外灯和过滤风,灭菌30分钟。 2、用镊子夹出洒精棉球擦拭桌面和实验者双手。 3、整个操作在酒精灯火焰旁进行 4、打开后或加塞前试管口、三角瓶口灼烧灭菌。;思考题;(二)液体培养基接种培养;(三)平板划线分离法;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.; 平板划线的操作方法 交叉划线法 连续划线法 ; 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?;3.在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?;(四)稀释涂布平板法;10g土样;(五)斜面接种及菌种保存;菌种的保存;思考题?;例1.关微生物营养物质的叙述中,正确的 A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量 C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量;超净工作台;实验一 大肠杆菌的培养和分离;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.

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