实验一 实验的基本知识及溶液的配制11.ppt

实验一 实验基本知识及缓冲溶液的配制 ;;一 ? 生化实验室规则; 6. 精密贵重仪器每次使用后应登记姓名并记录使用情况。要随时保持仪器的清洁。如发生故障，应立即停止使用并报告指导老师。 7. 按需要量取药品及蒸馏水等各种物品，注意节约。 8. 公用仪器，药品用后放回原处。不得用个人的吸管量取公用药品，多取的药品不得重新倒入原试剂瓶内。公用试剂瓶的瓶塞要随开随盖，不得混淆。 9. 交指导老师保存的样品，药品及其他物品都应加盖，并标注自己的姓名，班级，日期及内容物。 10. 保持台面，地面，水槽内及室内整洁，含强酸，碱及有毒废液应倒入废液缸。书包及实验不需之物品放在规定处。 11. 不得将含易燃溶剂的溶液近火。煤气灯应随用随关，严格做到：人在火在，人走火灭。漏电的设备一律不得使用。离开实验室前应该检查水电煤气是否关严。严禁用口吸或用皮肤接触有毒药品与试剂。 ; 二 溶液的配制步骤 ;（三） 溶解 1 选择溶剂 2 只能用烧杯溶解。 注意加入溶剂只能加入总体积的2/3左右，剩余溶剂洗涤烧杯三次左右，直到洗涤干净（相似相溶原理）。 配制酸碱两性物质（氨基酸，蛋白质，核苷酸等）时，如果溶解性不好，可以用稀酸或稀碱促进溶解，但pH应在被要求的范围内。 加热可以促进溶解，但注意应该在配制的范围内。;（四）定容 1 固体：先于小烧杯中加少量溶剂溶解，不溶时可稍加热（前提是溶质耐热），冷却后移到容量瓶中，用玻璃棒引流或用小漏斗，将小烧杯多洗几次。用溶剂加入到将容量瓶2/3时，将容量瓶水平方向摇动几周（勿倒置），使溶液大体混匀。在慢慢加溶剂到标线1cm左右，等1-2分钟，然后用滴官伸入瓶颈接近液面处，眼睛平视标线，加溶剂至液体凹与标线相切，盖瓶塞倒转，使气泡升到顶，将瓶震荡数次，再倒置，重复操作10次以上，才能混合均匀 2 液体稀释：用移液管移取一定体积的溶液于容量瓶中，再按上法进行。如果稀释时产生热量，可先于小烧杯中加少量溶剂溶解，冷却后移到容量瓶中，再按上法进行。;（五）装瓶 用容量瓶定容后， 装入试剂瓶，帖上标签。 标签应注明以下内容：药品浓度，名称，配 制人 和日期等。;三 缓冲溶液的配制 ; 例如：某一缓冲液由弱酸（HA）及其盐(BA)所组成，它的解离方程式如下： HA ≒ H﹢ ﹢ A﹣ BA ≒ B﹢ ﹢ A﹣ 若向缓冲液中加入碱（NaOH）, 则 HA ﹢ NaOH → NaA + H2O 弱酸盐 若向缓冲液中加入酸（HCl）,则 BA ﹢ HCl → BCl ﹢HA 弱酸 由此可见，向缓冲液中加酸或碱，主要的变化就是溶液内弱酸（HA）的增加或减少。由于弱酸（HA）的解离度很小，所以它的增加或减少对溶液内氢离子浓度改变不大，因而起到缓冲作用。; 实例：磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液 原理：加入盐酸溶液，其缓冲作用： NaH2PO4 + Na2HPO4 + HCl → 2 NaH2PO4 + NaCl 加入氢氧化钠溶液，其缓冲作用： NaH2PO4 + Na2HPO4 + NaOH →2 Na2HPO4 + H2O 缓冲溶液：磷酸氢二钠-磷酸二氢钠溶液 缓冲剂： 磷酸氢二钠和磷酸二氢钠 ; 2 配制100 ml 0.2 mol/l Na2HPO4溶液，100 ml 0.2 mol/l NaH2PO4溶液和100 ml 0.2 mol/l Na2HPO4- NaH2PO4缓冲液： (1) 计算 NaH2PO4·2H2O: 156.03×0.1×0.2=3.1206 (g) Na2HPO4·12H2O: 358.22×0.1×0.2=7.1644 (g) (2) 分别配制0.2 mol/l Na2HPO4和0.2 mol/lNaH2PO4各100ml，定容于容量瓶之后。注意：在容量瓶上帖标签。 (3) 按照一定的比例分别量取0.2 mol/l Na2HPO4和0.2 mol/lNaH2PO4溶液，混合后装入试剂瓶，贴上标签，标签应注明以下内容：pH值，药品浓度，名称，配制人和日期等。 (4) 磷酸氢二钠-磷酸二氢钠