实验一的.ppt

细菌培养技术细菌的形态学检查;医学微生物学实验室规则：;;3个系列实验： ①培养基的制备→细菌的接种→细菌的分布(水、空气、皮肤、咽喉)及理化因素对细菌的影响，二者对比进行→细菌涂片标本的制备及革兰染色法→油镜观察→细菌鉴定和药敏试验； ②病原性球菌和肠道杆菌的分离与鉴定； ③痘病毒的鸡胚培养→病毒的收获→病毒的血凝和血凝抑制实验→病毒表面抗原的检测；将不能纳入这3个实验体系中的一些重要实验，如细菌的生化反应，抗酸染色等在细菌或病毒培养的时间内穿插在系列实验中进行;一、培养基;二、分类;双糖铁培养基;培养基的制备程序;肉汤培养基制作方法;4.测定酸碱度并调至pH7.6，必要时用滤纸过滤。 5.按需要分装于试管或烧瓶内，加棉塞，置高压蒸汽灭菌器内，经121.3℃、20-30分钟灭菌。 6.灭菌后置37℃温箱孵育24小时，无杂菌生长，即可应用或放冰箱备用。 ;液体培养基加入1-2%的琼脂为固体培养基，加入0.5%琼脂为半固体培养基。固体培养基加入血液即为血平板（营养培养基）。 ;三、细菌的接种方法;1.平板分区划线接种：;分区划线;;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;2. 斜面接种法：;半固体培养基穿刺接种法 保存菌种或观察细菌的动力和生化反应 液体培养基接种法 用于肉汤、蛋白胨水、糖发酵管等液体培养基的接种 ;半固体培养基-鞭毛 观察细菌的运动;四、生长现象的观察;半固体培养基-鞭毛 观察细菌的运动;液体培养基-生长;操作内容; 形态学检查分类 一、不染色标本检查(活体） 悬滴法 压滴法 二、染色标本检查 单染法：简单染色，一种染料 （美兰染色） 复染法：复杂染色，两种以上染料（革兰染 色、抗酸染色）;染色标本检查法的一般步骤;革兰染色(Gram stain);一、目的; 1、通透性学说 2、等电点学说 3、化学学说; 通透性学说; 等电点学说;化学学说; 1、菌种 葡萄球菌 大肠杆菌 2、试剂 革兰染色液 初染液 结晶紫 媒染液 卢戈氏碘液 脱色液 95%乙醇 复染液 稀释石碳酸复红 3、其它 载玻片 染色盘 接种环 酒精灯等;冲洗;无菌操作（接种环灭菌和取菌） 涂片的厚度要适中 染色的时间控制，一一半半 冲洗的方法，不要对着涂片区冲洗;一 一 半 半;图一; 七、临床意义;细菌的特殊结构（示教）（二毛荚一胞）;菌发出比鞭毛更更细、短、直、硬和多的丝状蛋白附属物，与运动无关，菌毛中空，可分为普通菌毛和性菌毛 功能：普通菌毛附黏膜，性菌毛传递遗传物质 ;;菌体内部物质缩水（60％）形成圆或卵圆形小体。 功能：芽胞形态辨细菌， 灭菌标准抗力强。;油镜的使用方法;调试观察：观察目镜，并慢慢转动细调节器至物象清晰为止。［如果不出现物象或者目标不理想要重新寻找，在加油区之外重找时应按：低倍→高倍→油镜程序。在加油区内重找应按：低倍→油镜程序，不得经高倍镜，以免油沾污镜头。］ 清洗镜头：油镜使用完毕，先用擦镜纸擦去镜头上和标本上的香柏油，再用擦镜纸沾少许二甲苯（或乙醚）擦去残余的香柏油，最后再用干擦镜纸擦干净。; 实验报告;作业重点;