实验九、十 玫母联免疫吸附试验.ppt

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实验九、十 玫母联免疫吸附试验

实验九 酶联免疫吸附试验-ELISA 实验十 IgG的分离和纯化;实验九 酶联免疫吸附试 ( Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA);实验目的;实验原理;实验原理;实验原理;实验原理;ELISA-间接法;用于抗原及半抗原的定量测定,也可用于测定抗体。 以测定抗原为例,将特异性抗体吸附于固相载体上,加入待测抗原和一定量的已知酶标抗原,使二者竞争地与固相抗体结合,经过洗涤分离,最后结合于固相的酶标抗原与待测抗原含量呈负相关。;ELISA-双抗体夹心法;实验材料;夹心法检测HBsAg方法 ;酶:辣根过氧化物酶(HRP) 底物:3,3‘,5,5’-四甲基联苯胺(TMB) 在辣根过氧化物酶催化下,TMB会产生可溶性蓝色产物。使用2M ?H2SO4终止反应,在 450nm测定吸光度。;结果判断 ;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;实验报告;实验十 IgG的分??和纯化;实验目的;实验原理;血清蛋白质:复杂混合物。 1、白蛋白、a1、a2、β球蛋白,纤维蛋白原,凝血酶原和其它凝血因子等均由肝细胞合成。 2、γ球蛋白主要来自浆细胞。 免疫球蛋白大多数存在于丙种球蛋白(γ-球蛋白)中。 免疫球蛋白可以分为IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五类。;一般pH7.0时,50%硫酸铵饱和度可将所有的5种Ig(球蛋白)沉淀出来。33%饱和度大部分IgG可沉淀出来。 意义:制备出的纯化IgG,可用于酶标抗体或荧光抗体的制备。 ;实验器材;实验步骤;实验报告

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