实验三、犬瘟的热犬的病理组织学观察(高树修改).doc

实验五 犬瘟热犬的病理组织学观察 犬瘟热（canine distemper）是由犬瘟热病毒引起的犬科、鼬科和浣熊科等动物的一种急性、高度接触性传染性疾病。临床上以双相体温升高、急性鼻卡他和随后的支气管炎、卡他性肺炎、严重胃肠炎和神经症状为特征的传染病[1]。本实验通过收集犬瘟热病病例，对这些病例经过诊断后进行对症治疗，并且对其中治疗无效淘汰或者死亡的以及以安乐死术处死的自然感染病犬进行尸体剖检，对其具有明显病变的组织脏器采集病料，进行病理组织学观察，旨在对犬瘟热病理学的认识，为该病的诊断、治疗、判定预后提供相关的依据。 1材料与方法 1.1材料来源 来源于临床实践，病例资料来自本人在农八师兽医站和动物科技学院动物医院等地实习期间参与诊治的病例，主要是萨摩耶、杂种犬、松狮犬、谷牧犬等。 1.2实验仪器与药品试剂 1.2.1实验仪器 摊片烤片机一台、烘箱一台、德国Leica切片机一台、日本Olympus光学显微镜一台、Haier冰箱一台。 1.2.2药品试剂 10%甲醛、自来水、丙酮、乙醇（100%，95%，85%，75%）、二甲苯、熔融石蜡若干、苏木素染液、盐酸酒精染液、1%伊红酒精染液、蛋白甘油、树胶、组织剪、广口瓶、手术刀各一把、镊子（平角和尖角各一把）、玻璃缸若干、蜡缸若干烧杯若干、手表一个、纸张若干、水盆一个、酒精灯一个、火柴一盒、铁铲一个、木块若干、载玻片若干、盖玻片若干。 1.3病理切片的制作 取肠、肝、肺、脾、心等病变组织，将其切成1.5cm×1.5cm(长×宽)小块，并做好记号，放入10%的甲醛中固定24h。用自来水冲洗5-6h。脱水：在两缸丙酮溶液中浸泡各1h，两缸乙醇浸泡各1h，第三缸乙醇浸泡过夜。透明：在两缸二甲苯浸泡均不超过10min。浸蜡：温箱65℃，在三个蜡缸中浸蜡各1h，包埋，修蜡，切片。脱蜡：在三缸二甲苯中浸泡各5min，在不同浓度乙醇中浸泡，乙醇浓度由高到低按100%，95%，85%，75%各十秒。染色：在苏木素中浸染10～15min后用水缓慢冲洗至水清；然后在盐酸酒精中浸染3-5s秒使组织微红后用水缓慢冲洗使组织由红至篮；最后在1%伊红酒精中浸染5min，至水清。脱色：按照乙醇浓度由低到高按75%，85%，95%，100%浸泡各10s，在有二甲苯的三个小缸中各5min，然后滴加树胶封片。取典型病料制作石蜡切片，HE染色，光镜观察，拍照. 2．病死犬的解剖 尸检病变集中在神经系统、消化系统和呼吸系统。呼吸系统：气管、支气管中常有多量黏液或黏液脓性分泌物。肺脏出现散在分布大小、形状不一的实变病灶，多为暗红色、灰红色或黄白色。消化系统：胃、小肠、大肠腔内均有黏液，黏膜呈暗红色，有时可见小出血点。肝肿大、浅黄色。神经系统：大脑脑室扩张，脑室液增多，脑实质变薄[2]。 2.1 4个半月萨摩耶犬瘟热解剖 主要表现是呼吸道症状，发烧，在兽医院传染，最终安乐处死。 图1 图2 2.2黑白花犬瘟热死亡解剖 图3 图4 图5 2.3松狮犬犬瘟热肺部病变 图6 图7 2.4谷牧犬犬瘟热强阳性解剖图片 2.4.1谷牧犬肺脏病变纹路病变颜色变淡图片 图8 图9 图10 图11 2.4.2 谷牧犬腹腔解剖图片 图13 2.4.3 谷牧犬肾脏图片 图14 图15 3 主要病理组织学变化 3.1 肝脏和胆管　肝细胞颗粒变性、脂肪变性，呈大量空泡状；肝窦变窄，部分区域淤血， 在肿大变性的肝细胞中可见少量细胞浆包涵体。胆管上皮细胞高度肿胀，变性坏死脱落，与 大量黏液和炎性细胞充满整个管腔，胆管周围的毛细血管严重充血。 图1 肝淤血（HE,10×10） 图2 肝淤血，肝细胞坏死(HE,40×10) 图3 间质性肺炎, 肺间质增宽，内 图4 间质性肺炎, 肺间质增宽，内 有淋巴细胞和巨噬细胞浸润(HE,10×10) 有淋巴细胞和巨噬细胞浸润(HE,40×10) 图5 间质性肺炎, 肺间质增宽，内有