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实验十一 多沟能发酵法测定水中大肠菌群
多管发酵法测定水中大肠菌群;多管发酵法测定水中大肠菌群;一、实验目的; 发酵法： 又称多管发酵法或三步发酵法
1) 初发酵（推测试验）：
将不同稀释度的水样，分别接种于含有乳糖等糖类的培养液中（3倍或1倍乳糖液），经37 oC培养24 h，观察产酸产气情况，培养基内加有溴甲酚紫作为PH指示剂，细菌产酸后，培养基即由原来的紫色变为黄色，以初步判断是否有大肠菌群存在。;2）平皿分离（证实试验）;3） 复发酵试验(完成实验）;三、实验材料;四、操作步骤;（2）平板分离
将经24 h和48 h培养后产酸产气的发酵管，分别划线接种于伊红美蓝琼脂平板上，再于37 ℃培养18～24 h，将符合下列特征的菌落进行染色镜检。
深紫黑色，有金属光泽；
紫黑色，不带或略带金属光泽；
淡紫红色，中心颜色较深。;（3）复发酵试验
将镜检为???兰氏阴性无芽孢杆菌的菌株重复初步发酵试验。并根据初发酵管试验的阳性管查表，即得大肠菌群数。;图1 多管发酵测定水中大肠菌群的操作步骤和结果解释;五、思考题
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