实验报告 201的0 细菌总数.doc

华东交通大学开放性试验 PAGE  PAGE 6 大学活动场所室内环境细菌密度测定 实验成员：罗小青、施俊译、上官玉虎、叶紫宇、徐丹丹 1、 目的：了解在校学生主要活动场所室内环境细菌密度情况，提高学生对自己环境卫生意识，同时锻炼学生的实际操作能力。 2、 方法：该测定有两种方法，其一是撞击法，它是通过抽气动力作用，使空气通过狭缝或小孔而产生高速气流，从而使悬浮在空气中的带菌粒子撞击到培养琼脂平板上，经37℃、48h培养后，计算每立方米空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法。另一种方法是自然沉降法，即采样法，它是在直径9cm的营养琼脂平板在采样点暴露5min，或更多暴露时间进行分析，再经37℃、48h培养后，计算生长的细菌菌落数的采集测定方法。由于设备的不完全，该细菌测定方法采用采样法。 3、仪器和设备 3.1 高压蒸汽灭菌器 3.2 恒温培养箱 3.3 30个培养皿（直径90mm） 3.4 锥形瓶 3.5 PH试纸 3.6 酒精灯 4 培养基 4.1 营养琼脂培养基 4.1.1 成分：蛋白胨 10g 牛肉膏 3g 氯化钠 5g 琼脂 15~20g 蒸馏水 1000mL 制法：将上述各成分混合，加以溶解，校正PH至7.4，过滤分装，在121℃20min高压灭菌，用自然沉降法测定时，倾注15mL于培养皿中，制成营养琼脂平板。 操作步骤 设置采样点时，应根据现场的大小，选择有代表性的位置作为空气细菌检测的采样点，通常设置5个采样点，高度为1.2~1.5m。采样点应远离墙壁1m以上，并避开空调、门窗等空气流通处，本实验选择了食堂、宿舍作为实验场所，其中采样宿舍位于食堂旁边的六楼，也是我们队员男生生活的地方（四人间），通过我们生活场所来反映我们学校学生宿舍的环境情况，其采样布置点为阳台、床铺旁、书桌、门口和卫生间。采样食堂位于人比较密集的地方，以更准确的反映食堂卫生环境，其采样布置为收餐台、台子、门口、洗碗池和窗户。 将营养琼脂平板置于采样点处，打开皿盖，暴露5min盖上皿盖，翻转平板，置36℃±1℃恒温箱中，培养48h 计数每块平板上生长的菌落数，求出全部采样点的平均菌落数，以每平皿菌落数（CFU/皿）报告结果。 实验主要步骤如下图所示： 结果分析 菌落生长情况如图： 结果计算与分析： 6.2.1宿舍对应的数据如下： 宿舍　 　 　 　S阳台(CFU/皿)S床铺旁(CFU/皿)S书桌(CFU/皿)S门口(CFU/皿)S卫生间(CFU/皿)342870312060853112783475055841平均47.00 54.33 52.00 55.33 48.00 宿舍平均菌落(CFU/皿)51.33 6.2.2食堂对应的数据如下： 食堂　 　 　 　T收餐台(CFU/皿)T台子(CFU/皿)T门口(CFU/皿)T洗碗池(CFU/皿)T窗口(CFU/皿)395115215055536377230126无法计数25无法计数平均41.33 60.67 　无法计数25.67 　无法计数食堂平均菌落(CFU/皿)无法计数 6.2.3数据分析： 我校某宿舍平均菌落数为51.33(CFU/皿)，依据《室内空气质量标准》GB/T18883-2002卫生标准： 生物性菌落总数cfu/m32500依据仪器定b按奥梅梁斯基氏计算法：在面积为100cm2的培养基表面，5min沉降下来的细菌数相当于10L空气中所含的细菌数。100cm2培养基的菌落数=每块平板数÷πr2×100=80.69(CFU)， 1m3细菌数=80.69/10*1000=8069(CFU)，远大于室内标准，说明了该宿舍空气质量比较差，所以在我们生活当中应常开窗，保持空气对流，同时要定时打扫卫生，使我们生活得更加舒适。对于食堂而言，我们可以看到上图细菌生长情况，有的无法计数（太多），这也说明了该场所的细菌比较多，依据《饭馆、餐厅卫生标准》GB16153-1996卫生标准： 空气细菌数撞击法，cfu/m3≤2500沉降法，cfu/皿≤30远超过标准，食堂其实是我们在学校一日三餐、人流通密度大的重要公共场所，对我们身心健康影响重大，为提高食堂空气质量，应对其场所常开窗（方便而重要的方法），保持空气对流，吃饭时应养成洗手的好习惯等等。 参考文献： 1、环境工程微生物学（周群英、王士芬 编著