常用pH缓冲溶的液的配制和pH值.doc

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??(一)溶液配制注意事项 1.药品要有较好的质量??试剂分为优级纯(保证试剂,Guaranteed?reagent,G.R.)、分析试剂(Antalytical?reagent,A.R.)化学纯(Chemical?pure,C.P.)和实验试剂(Laboratory?reagent,L.R.)等等。工业用的化学试剂,杂质较多,只在个别情况下应用,如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。 2.药品称量要精确。 3.配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水,比电阻值在50万欧姆以上,pH在5.5~7.0之间才可应用,在组织培养等特殊用途时应注意此项要求,配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。 4.配好后的溶液,应立即除菌处理(如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质),以防杂菌生长。 (二)0.067(1/15)Mol/L磷酸缓冲液 1.1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制:称取磷酸二氢钾(KH2PO4,A.R.)9.08g,用蒸馏水溶解后,倾入1?000ml容量瓶内,再??释至刻度(1?000ml)。 2.1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制:称取无水磷酸氢二钠(Na2HPO4,A.R.)9.47g(或者Na2HPO4·2H2O?11.87g)用蒸馏水溶解后,放入1?000ml容量瓶内,再加蒸馏水稀释至刻度(1?000ml)。 3.按附表的比例,配制成不同pH值的缓冲溶液。 附表1?磷酸盐缓冲液配制法(单位:毫升) pH?1/15Mol/L?Na2HPO4?1/15Mol/L?KH2PO4?pH?1/15Mol/L?Na2HPO4?1/15Mol/L?KH2PO4? 5.8?8.0?92.0?7.1?66.6?23.4? 5.9?9.9?90.1?7.2?72.0?28.0? 6.0?12.2?87.8?7.3?76.8?23.2? 6.1?15.3?84.7?7.3?80.8?19.2? 6.2?18.6?81.4?7.5?84.1?15.9? 6.3?22.4?77.6?7.6?87.0?13.0? 6.4?26.7?73.3?7.7?89.4?10.6? 6.5?31.8?68.2?7.8?91.5?8.5? 6.6?37.5?62.5?7.9?93.2?6.8? 6.7?43.5?56.5?8.8?94.7?5.3? 6.8?49.6?50.4?8.1?95.8?4.2? 6.9?55.4?44.6?8.2?97.0?3.0? 7.0?61.1?38.9?8.4?98.0?2.0? (三)0.15Mol/L?PB液 附表2??0.15Mol/LPB液配制法 pH?0.15Mol/L?Na2HPO4(ml)?0.15Mol/L?NaH2PO4(ml)? 6.4?26.5?73.5? 6.6?37.5?62.5? 6.8?49.0?51.0? 7.0?61.0?39.0? 7.2?72.0?28.0? 7.4?81.0?19.0? 7.6?87.0?13.0? Na2HPO4·2H2O分子量=175.05???0.15Mol/L溶液含26.7g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量=358.22??0.15Mol/L溶液含53.7g/L。 NaH2PO4·H2O分子量=138.00????0.15Mol/L溶液含20.7g/L。 NaH2PO4·2H2O分子量=156.03???0.15Mol/L溶液含23.4g/L。 (四)0.2Mol/L?PB缓冲液 附表3??0.2mol/L?PB缓冲液配制法 pH?0.2?Mol/L?Na2HPO4(ml)?0.2Mol/L?NaH2PO4(ml)? 5.8?8.0?92.0? 6.0?12.3?87.7? 6.2?18.5?81.5? 6.4?26.5?73.5? 6.6?37.5?62.5? 6.8?49.0?51.0? 7.0?61.0?39.0? 7.2?72.0?28.0? 7.4?81.0?19.0? 7.6?87.0?13.0? 7.8?91.5?8.5? 8.0?94.7?5.3? ??? 0.2Mol/L?Na2HPO4·2?H2O溶液35.61g/L ????????????Na2HPO4·12?H2O溶液含71.64g/L ????0.2Mol/LNaH2PO4·H2O溶液含27.60g/L ???????????NaH2PO4·2?H2O溶液含31.21g/L 欲配0.1Mol/L?PB缓冲液则在0.2Mol/L?PB缓冲液的基础上加H2O稀释1倍即可。欲配制PBS液时,则在溶液中加0.85%的NaCl溶液即可。 (五)无钙镁离子磷酸缓

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