周老师丁老师考试重点1.doc

1感受态细胞：处于最适于摄取外源DNA的生理状态的细胞。 2. RNAi技术：通过反义RNA与正链RNA形成双链RNA特异性抑制靶基因的转录后表达的现象，存在于从低等的线虫到人类培养细胞等多种有机体. 3. 基因家族：基因组中存在的许多来源于同一个祖先，结构和功能相似的一组基因。同一家族的这些基因的外显子具有相关性，可在基因组内集中或分散分布。 4. 增强子：增加同它连锁的HYPERLINK /view/8563.htm基因转录频率的DNA序列 5. 基因沉默：由于多种影响因子或限制因素的影响，使转基因在受体植物中不能稳定表达或完全不表达的现象，叫作转基因沉默。 6.过量表达技术：通过各种方式使基因的表达超过组织正常需要量的技术方法。 7. 启动子：一段能被RNA聚合酶特异性识别和结合，能正确有效的起始转录的一段DNA调控序列，一般位于基因5’端上游区域。 8. 图位克隆：以分子标记连锁图谱为基础的基因克隆，也称基因定位克隆。 9. 同源基因的共抑制效应：外源基因沉默的同时，与其同源的内源基因的表达也受到抑制。 10.植物组织培养：是指将植物的离体器官（如根、茎、叶、花、果实、种子等）、组织（如花药、胚珠、形成层、皮层、胚乳等）、细胞（如体细胞、生殖细胞花粉等）以及去除细胞壁的原生质体，甚至幼小的植株，在人工控制的无菌环境下，应用人工培养基创造适宜的培养条件，使其生长、分化并成长为完整植株的过程。也称为离体培养或试管培养。 1．简述重组DNA技术的基本步骤？（也是基因克隆） 主要包括四部分工作： 目标DNA片段（ORF/Promoter）的获得： = 1 \* GB3 \* MERGEFORMAT ①、化学法直接合成基因  = 2 \* GB3 \* MERGEFORMAT ②、通过PCR直接扩增出目的基因， = 3 \* GB3 \* MERGEFORMAT ③从基因组文库中钓取目的基因  = 4 \* GB3 \* MERGEFORMAT ④、从cDNA文库中钓取目的基因 = 5 \* GB3 \* MERGEFORMAT ⑤、以人工突变体为基础的基因克隆方法 2、克隆载体的构建；基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子、标记基因。 3、寄主细胞的转化； 4、重组体克隆的选择和鉴定 2. 简述真核基因表达调控的种类？、 真核基因表达调控的种类：DNA水平调控，转录水平调控，转录后水平调控，翻译水平调控，蛋白质加工水平的调控。 3. 简述载体应当具备的条件？ 1、克隆载体的DNA分子上通常含有1个或多个克隆位点 供外源的DNA片段插入到克隆载体上。 2、携带有外源的DNA片段 (基因) 进入到宿主细胞中能够进行自我复制，或者外源的DNA片段能够整合染色体随着染色体的DNA复制而同步进行自我的复制。 3、载体必须具有可供选择的标记, 如抗生素标记。 4、载体必须是安全的, 不含有对受体细胞有害的基因, 对于细胞的生长不会产生显著的影响。 4. 与常规育种相比，转基因育种的优点？ 与常规育种方法相比, 它具有以下一些特点: ① 不受亲缘关系的限制, 可实现动物、植物和微生物间遗传物质的交流, 从而充分利用自然 界存在的各种遗传资源; ② 有效地打破有利基因和不利基因的连锁, 充分利用有用的基因; ③ 加快育种进程, 缩短育种年限。 简述转基因可以从哪几个层面进行检测？ 外源基因整合的分子鉴定 外源基因转录水平的分子检测 外源基因翻译（蛋白）水平的分子检测 简述常用的三种基因克隆的方法？ 已知基因序列为基础的基因克隆 1、化学法直接合成基因 2、通过PCR直接扩增出目的基因 未知基因序列的基因克隆 1、从基因组文库中钓取目的基因 2、从cDNA文库中钓取目的基因 3、以人工突变体为基础的基因克隆方法 7．以水稻为例详细论述农杆菌介导的转基因技术的具体操过程? (1) 水稻愈伤组织的诱导与继代 (2) 农杆菌的制备 (3) 水稻愈伤与农杆菌的共培养 (4) 洗菌 (5) 抗性愈伤组织的筛选 (6) 愈伤组织的分化 (7) 再生植株的生根、炼苗和移栽 8. 什么是转基因育种？结合你的理解，谈谈转基因育种在现代农业中会有哪些常见的具体应用？ 转基因育种就是将植物遗传转化和常规育种技术相结合，培育具有特定目标性状的植物新品种。按性状分： （一）抗病毒基因工程：目前已知的植物抗病毒基因主要有：外源病毒外壳蛋白（coat protein，CＰ）基因 （二）抗虫基因工程： （三）抗除草剂基因工程 （四）抗真菌、细菌病害基因工程 （五）其它性状的基因工程 9. 分子克隆技术常用的PCR技术和荧光定量PCR技术？ PCR技术：也叫聚合酶链反应（polymerase?chain?rea