自动生物化学分析仪应用与原理.pptVIP

自动生物化学分析仪的应用与原理 自动生物化学分析仪的特点: 精密度高，功能齐全； 可进行吸光度、浓度和酶活力的测定，能使用终点法和连续监测法进行分析； 具有快速、简便、微量、标准化、样品和试剂用量低等优点。 一、分析方法的种类 (一)终点分析法(平衡法) 终点分析法是基于反应达到平衡时反应产物的吸收光谱特征及其对光吸收强度的大小，对物质进行定量分析的一类方法，它是实验室最常用的方法之一。 一点终点法：一点终点法的特点是使用一种或两种试剂。当样品和试剂混合后，待测物与试剂的物理化学反应达到终点时，测定吸光度,计算待测物的浓度。该法具有代表性的试验有：总蛋白、清蛋白、葡萄糖氧化酶法等。 两点终点法：两点终点法也称固定时间法，它可以用一种试剂，也可以用两种试剂。该方法的优点是可以消除样品、试剂的颜色、浊度，以及一些干扰物质对测定的干扰。 双波长法：其原理是检测计在对一待测物进行检测时，同时用两个波长检测，用主波长的吸光度减去副波长的吸光度，标准物与待测物同等对待，计算待测物的浓度。 (二)连续监测法 测定底物的消耗或产物生成速度的化学方法称为连续监测法。它是通过适当的仪器，连续测定酶促反应过程中某一反应产物或底物的浓度随时间变化的多点数据，求出酶反应初速度，间接计算酶活性浓度。 具体方法有： 1．两点速率法 2．多点速率法 3．回归法 4．带速率时间法 (三)比浊测定法 通过检测物质对光的散射或透射强度来测定物质的方法称比浊法。免疫透射比浊法是自动生物化学分析仪常用方法。目前常用的免疫比浊法主要用于血清特种蛋白的检测，如载脂蛋白、微量蛋白、急性时相反应蛋白、免疫球蛋白以及某些药物监测等。 (四)均相酶免疫分析法 该类方法是以生物体内某种特异性很强的结合反应作为测定基础，在结合反应中可将某种参加反应的反应物用标记物加以标记。利用酶作标记物，以抗原抗体相互结合的免疫反应为基础的方法称酶免疫分析法。 二、自动生物化学分析仪实验参数的设置 主要包括样品量、试剂量、测定方法、校正方法、反应时间、测定波长和控制因素等。 (一)样品与试剂量 样品与试剂量的确定一般按照试剂说明书上的比例，并结合仪器的特性进行设置。仪器的特性有：样品和试剂的最小加样量及加量范围、最小反应液的体积等。 (二)试剂的选择 单试剂法：在反应过程中仅加一次试剂的方法称单试剂法。其常见的有： ①单试剂单波长法：指在选定的温度和某一特定的波长，读取反应一定时间时的吸光度的方法。这是单试剂法中最常见的方法。 ②单试剂双波长法：单试剂双波长法主要是为了消除检测体系或标本的混浊而设置。自动生物化学分析仪大部分终点分析均用此法。 ③标本空白法：该法使用单波长或双波长均可，常用本法来做终点分析。 双试剂法:其常见的有: ①双试剂单波长一点法：检测试剂分成两部分加入，只读一次吸光度。 ②双试剂二点法：为了去掉标本色素、浊度的影响，也可用双试剂，在加入第一试剂后读取一次吸光度，再加第二试剂，反应一定时间后再读取一次吸光度，依两次吸光度之差计算结果。 ③双试剂双波长法 (三)测定方法的选择 半自动生物化学分析仪一般具备其中的一点终点、两点终点(单试剂)、连续监测法(只能是一种固定方法)。全自动生物化学分析仪的功能较全面，具有前述的各种方法，可根据需要进行选择。 (四)波长的选择 单波长：单波长是用一个波长检测物质的光吸收强度的方法。当测定体系中含有一种组分或在混合溶液中待测组分的吸收峰与其他共存物质的吸收波长无重叠时，可选用。 双波长：用两个不同波长检测。当被检溶液混浊或存在较大的干扰物质的光吸收时会出现光散射和非特异性光吸收，从而影响测定结果的准确性，此时可用双波长甚至多波长测定，以提高测定结果的准确性。 (五)分析时间的选择 生物化学反应的时间是某一项目所特有的，根据所采用的测定方法不同而异。反应时间应根据试剂说明书或自己试验观察，作合理的选择和设置。 * * 第一节 自动生物化学分析仪的类型 ①按反应装置的结构可分为连续流动式、离心式、分立式和干片式四类。 ②按自动化程度可分为全自动和半自动型。 ③按同时可测定项目可分为单通道和多通道两类。 ④按仪器的复杂程度及功能可分为小型、中型和大型三类。 一、连续流动式自动生物化学分析仪 连续流动式自动生物化学分析仪是第一代自动分析仪，在测定过程中各待测样品与试剂混合后的化学反应均在同一管道内流动的过程中完成。 （一）仪器结构 仪器主要构成部件有：样品盘、比例泵、混合器、透析器、恒温器及检测装置组成。 （二）工作原理 在微机控制下，通