泌尿生殖system药效学研究.ppt

泌尿系统与男性生殖系统药效学研究的设计和方法 2 观察指标 (1)生化指标：①血肌酐(BUN)、血清尿素氮(Scr)水平；②24h肌酐、尿素总排出量；③24h肌酐清除率。 (2)尿常规检查：①24h总尿量；②24h蛋白和管型等。 (3)病理形态学检查。 (4)其他可供分析的指标：①血清总蛋白和白蛋白；②对主要以损害肾小管功能的模型；如庆大霉素ARF模型可选择NAG酶及溶菌酶作为观察指标反映肾小管损伤的严重程度。 * * 第一节 急性肾功能衰竭药 一、试验设计的医学基础 急性肾功能衰竭(简称ARF)是危急重症，属中医“癃闭”、“关格”、“肾风”等范畴。其临床表现主要是小便点滴而下，或点滴全无，起病往往突然发作。治疗乃根据“腑以通为用”的原则，着重于通。实证宜清湿热、散瘀结、利气机而通水道；虚证宜补脾肾、助气化而达到小便自通的目的。改善少尿、氟质血症和肾小管坏死是治疗ARF药效学的主要研究内容。 二、药效学研究的实验设计 (一)急性肾衰动物模型 l 常用动物模型 (1)大鼠血红蛋白尿ARF模型；以甘油肌内注，24h后即有尿素氮升高，少尿或无尿等类似人的ARF症状。 (2)犬去甲肾上腺素模型：雄性犬麻醉以适当的去甲肾上腺素经—侧肾动脉连续滴注，引起肾流量急剧下降，同侧输尿管收集的尿量也相减少等一系列肾衰症状。 (3)犬夹闭肾动脉引起的ARF模型：麻醉犬用外科手术暴露肾动脉夹闭1h，引起的缺血性肾功能衰竭。 (4)汞剂引起的动物ARF模型：以适当剂量的氯化汞静脉注射家兔，皮下或静脉给大鼠，l—2日引起肾小管损伤，出现急性肾功能障碍的—系列变化。 (5)大鼠抗生素ARF模型：大剂量抗生素(庆大霉素)给大鼠腹腔注射，通过影响肾小管上皮细胞膜脂代谢及抑制线粒休的能量代谢，造成肾小管损害，引起尿量改变及尿蛋白和尿素氮升高等急性症状。 3，方法学评价 (1)ARF模型较多，从机制分为缺血性和中毒性。 一般认为大鼠血红蛋白尿性ARF模型二种机制均有，接近于人的创伤性ARF，特别是积压综合征。在此模型早期，肾血管阻力增加，肾血流量减少，肾皮质区域的血管重度收缩，如所试药物可能有类似于异博定的降低肾血管力、增加肾血流量等作用，采用此模型较适当。本模型所用动物价廉易得，方法简便，病变稳定，在—定时间内做动态观察，也可用家兔，以便多次采血检查。此模型是新药药效较常用的模型。 (2)家犬去甲肾上腺素及家犬夹闭动脉引起的ARF模型均属缺血性ARF，机制相同，所用动物相同。 (3)汞剂引起的ARF属于中毒性ARF模型。特点为简单易行，病变较稳定，用家兔、大鼠、小鼠作模型动物。 (二)相关药效学试验和机制研究 1，辅助试验 对能反映解除主症有作用的其他试验，如药物的利尿作用、血管扩张作用对高血钾，酸中毒的控制作用，以及药物对其他原因引起的氮质肌症的影响，均可酌情选用。 2．作用原理研究 如用水清除率、截流分析实验、肾小管微穿刺技术等探时药物作用部位和功能。这研究对了解新药特点很有意义。 (三)阳性对照药 (1)地塞米松。 (2)维拉帕米(异博定)。 三、急性肾衰动物模型建立方法 (一)大鼠血红蛋白尿ARF模型 1．原理 肌内注射甘油后，大鼠肾血流减少，肾小管内皮细胞肿胀，增大了肾血管阻力，血管节段性坏死，外膜纤维化．血管自身调节功能丧失，导致肾小球滤过下降。另外，肾小球及肾小管用围纤维蛋白沉积，血臂内血液淤积，血栓形成，血流不畅，导致肾小球滤过率下降，肾小管坏死。 2．操作方法 采用体重150～250g雄性大鼠，置代谢笼中。纪录正常饮水量从尿量，用药前禁水24h。选体重减轻并有脱水的大鼠以50％甘油按10ml／kg分别在两侧后肢肌内注射.大鼠自由进食和饮水，—般于2h后出现血红蛋白尿，48h形成稳定模型。1—5日内进行实验。 3．造模成功指标和药物疗效观察 (1)24h尿量较对照组明显减少，尿蛋白明显升高。 (2)BUN、Set明显增高，血清总蛋白减少。 (3)血清K、Na增高。 (4)病理学检杳可见明显的肾小管病变。 所试药物的药效可根据用药后对以上指标的改善来评价，结果进行组间比较，统计学处理采用t检验。 4．注意点 (1)个别大鼠叫在肌注甘油后，肾脏损害过重而北亡。 (2)禁水24h后体重减轻明显，脱水严重的大鼠选作实验动物效果较好。 (二)犬去甲肾上腺素ARF模型 l 原理 去甲肾上腺素引起肾血管收缩而致肾小球的血流减少