中草药治疗骨肉瘤的基础研究进展.docVIP

　　中草药治疗骨肉瘤的基础研究进展 作者：朱均 吴智南 徐卫东 陈俊 【关键词】 骨肉瘤 中草药 研究进展 骨肉瘤是高度恶性的间叶组织肿瘤，其特点是恶性肉瘤基质细胞产生骨样基质。骨肉瘤好发于青少年和年轻成人，约占儿童肿瘤的5%，骨肉瘤在局部呈侵袭性生长并且易发生转移。 历史 上，对骨肉瘤的评估和 治疗 主要是患部及胸部X线平片和截肢[1]，用这种方法治疗只有10％～20%的患者能够长期存活[2]。近20年来，对骨肉瘤的诊断和治疗取得了巨大的进步。利用先进的影像技术（CT和MRI）能够清晰地显示肿瘤的局部解剖情况、生长方式和发现隐匿的肺转移灶。同时，经过改良的分级系统有助于判断患者的预后。多药联合化疗极大地提高了患者的长期生存率和施行保肢术的可能性。其他方面的进步，如假体的设计和对异体骨使用经验的积累等，使肢体骨肉瘤患者的保肢手术率提高至90％～95%，但骨肉瘤总体5年生存率只有60％～70%[3]。中医积累了不少诊治骨肉瘤的经验，为进一步提高骨肉瘤的生存率提供了可能。 1 中药提取物的研究 近年来，许多学者在中药提取物诱导骨肿瘤细胞的凋亡、抑制骨肿瘤细胞增殖、诱导成骨肉瘤细胞分化等方面取得了不少成绩。 1.1 诱导骨肿瘤细胞的凋亡 中药提取物诱导骨肿瘤细胞凋亡的研究成为重点，又以砷化物的研究较为深入。袁林[4]等利用MTT 法观察全方式维甲酸（ATRA）对MG63细胞的生长抑制作用,结果证明，ATRA能抑制骨肉瘤细胞增殖并能引起凋亡，且呈时间和剂量依赖效应。张春林[5]用不同浓度的紫杉醇作用于骨肉瘤细胞MG63，采用胎盼蓝染色法,光镜和 电子 显微镜观察细胞形态改变；采用原位缺口末端标记法( TUNEL)、TUN和流式细胞术(AnnexinV+FITC PI) 对细胞凋亡进行检测。采用免疫组织化学法检测凋亡调节基因bcl2 和bax表达。结果证明紫杉醇可以通过时间依赖性和剂量依赖性方式,促使细胞G2 / M 期阻滞和抑制细胞有丝分裂,从而诱导人骨肉瘤细胞凋亡。这种凋亡可能受到凋亡相关基因bcl2低表达和bax高表达的调控。肖涛[6]用MTT法、透射电镜、琼脂糖凝胶电泳等方法观察AS203诱导MG63细胞凋亡的作用。证明As2O3可诱导骨肉瘤细胞凋亡，其作用机制有待进一步探讨。魏玲[7]利用MTT法观察As2O3对U20S细胞的生长抑制作用；AnnexinVTITC+PI双参数检测细胞凋亡；流式细胞仪测定经不同浓度As2O3处理后细胞增殖细胞核抗原（PA）、凋亡相关蛋白Fas和bcl2阳性细胞百分率及细胞内钙离子（IE Ca2+）含量变化。证明As2O3在体外可显著抑制人骨肉瘤细胞U20S生长并引起凋亡，其机制可能与上调Fas表达和IE Ca2+含量及降低PA蛋白表达有关。刘勇[8]应用噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞生长抑制率、倒置显微镜观察细胞形态、AnnexinV法检测细胞凋亡、逆转录聚合酶链反应（RTPCR）法检测Fas、bcl2基因的表达，观察硫化砷对骨肉瘤细胞株MG63诱导凋亡的作用。证明硫化砷可有效地诱导骨肉瘤细胞凋亡，bcl2表达下调是诱导细胞凋亡的重要机制。 1.2 抑制骨肿瘤细胞增殖 许多中药成分除了具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用，还可以抑制骨肿瘤细胞的增殖。王利民[9]将不同浓度的苦参碱作用于培养的OS732骨肉瘤细胞，通过MTT比色法、流式细胞仪和凝胶电泳、电子显微镜技术观察检测细胞凋亡，研究分析其对骨肉瘤细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。苦参碱能显著抑制OS732细胞增殖、促进其凋亡。尹军强[10]应用MTT法，测定蟾酥水提取物对细胞株活性的影响，检测其抑制骨肉瘤细胞的时间效应和剂量效应；应用形态学观察，测定蟾酥水提取物对U20S细胞的凋亡作用，并进行细胞周期的分析。证明蟾酥水提物对骨肉瘤U20S细胞株的增殖有凋亡和抑制作用。 有些药物在抑制骨肿瘤细胞增殖方面效果较为突出。陈永强[11]以骨肉瘤U20S细胞体外培养，采用台盘蓝排染法观察蜂毒素对细胞生长的影响，MTT法测定细胞增殖抑制率，流式细胞仪检测细胞周期和增殖细胞核抗原（PA）的表达。提示蜂毒素具有抑制骨肉瘤U20S细胞株生长、增殖的作用。赵晓宏[12]利用各种色波谱技术进行分离纯化升麻，根据理化性质和各种波谱技术辅以化学方法进行结构鉴定。结果表明，其中新三萜皂苷类成分有对大鼠成骨肉瘤细胞株（URM106）有明显的增殖作用的化合物。彭桂娥[13]采用掺入法观察中草药黔岭藿对大鼠成骨肉瘤细胞（UMR106）增殖的影响，结果黔岭藿能明显抑制URM106细胞的增殖，具有抑制成骨样细胞的作用。董宁征[14]应用MTT法测定一叶秋碱对人早幼粒细胞白血病细胞HL60、人红白血病细胞K562、人骨肉瘤细胞HOS8603、人脑