中药何首乌的化学成分研究.docVIP

　　中药何首乌的化学成分研究 中药何首乌的化学成分研究 中药何首乌为为蓼科Polygonaceae 何首乌属多年生草本植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的块根。该植物多生于山坡石缝中、篱边、林下、山脚或灌木丛中，在我国大部分地区都有出产，主产于河南、湖北、贵州、四川、广东、广西等地。其根细长，先端膨大成肥大不整齐的块根，表面红褐色至暗褐。中药何首乌有生首乌与制首乌之分，是典型生制两用的药材，生首乌能润肠通便、解毒消痈，制首乌则具有补益精血、乌须发、强筋骨、补肝肾的功效[1]。目前，已经从何首乌中分离得到了近百种化合物，主要为蒽醌类成分、二苯乙烯苷类和黄酮类等成分[2-3]。药理研究发现，何首乌具有神经保护、抗衰老、增强免疫力、调节血脂、肝脏保护等作用[4-6]。在研究天然药物活性物质与功能的过程中，作者对何首乌的化学成分进行了分离，鉴定了6个化合物，包括1个新化合物。 　　1 材料 　　MERCURY-400核磁共振仪（美国Varian 公司），Bruker V-600超导核磁共振仪（德国Bruker公司）（TMS为内标物）； Q-TOF 型质谱仪（美国Applied Biosystems公司）；傅里叶变换红外Nicolet 5700光谱仪（美国Thermo公司）；LC-6AD制备型高效液相色谱仪（日本岛津公司），YMC Pack ODS-A（20 mm250 mm，5 mu;m）制备色谱柱；柱色谱硅胶（200～300目）和薄层色谱用硅胶GF254为青岛海洋化工厂生产；反相柱色谱填料 GH-ODSB-12S50（50 mu;m）为日本YMC公司生产；反相C18高效薄层板为德国Merck公司生产；凝胶柱色谱填料Sephadex LH-20 为瑞典GE公司生产；实验室所用试剂均为分析纯（北京化工厂）。 　　何首乌药材于2011年10月采购于北京同仁堂药店，产地为湖北，经本课题组鉴定为何首乌P. multiflorum生品的块根。 　　2 提取与分离 　　干燥的何首乌块根粉末（5.0 kg）以95%乙醇回流提取5 次，每次5 L，每次提取时间均为1 h。提取液合并，浓缩后得浸约500 g。将上述浸膏用水混悬后，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，回收石油醚、乙酸乙酯和正丁醇，分别得到石油醚萃取物（17.5 g）、乙酸乙酯萃取物（110 g）和正丁醇萃取物（50 g）。将剩余溶液回收至无醇，加水溶解，得水部分（300 g）。 　　乙酸乙酯部分用正相硅胶柱色谱，氯仿-甲醇系统梯度洗脱（100∶0，70∶30，50∶50，25∶75，0∶100），得到14个部分（Ea 1～14）。 其中Ea11经硅胶柱色谱分为2个部分（Fr1～Fr 2）。Fr2经ODS反相柱色谱，以甲醇：水（10∶90，30∶70，45∶55，60∶40，80∶20）梯度洗脱，分为7个部分（Fr2-1～Fr2-7）。Fr2-2经硅胶柱色谱，以氯仿-甲醇（70∶30）洗脱， 再经ODS反相柱色谱以40% 甲醇-水做洗脱液，得到化合物1（0.6 mg），2（3.6 mg）。 Fr2-3经硅胶柱色谱，以氯仿-甲醇（90∶10，70本文由.L.收集整理∶30，50∶50，30∶70）梯度洗脱，分为4个部分（Fr2-3-1～Fr2-3-4）。 Fr2-3-1 经ODS反相柱色谱，70%甲醇洗脱，得到化合物5（2.7 mg）。Fr 2-3-2经ODS反相柱色谱，以40%甲醇洗脱，分为3个部分（2A～2C）。 2A经HPLC纯化（45% 甲醇，流速为 5 mLmin-1），分离得到化合物3（5.8 mg）。2B 经硅胶柱色谱，以氯仿-甲醇（25∶1）洗脱后，又经Sephadex LH-20柱色谱，氯仿-甲醇（20∶1）纯化得到化合物4（5.6 mg）。Fr2-6经硅胶柱色谱，以石油醚-乙酸乙酯（2∶1）做洗脱液，得到化合物6（2.3 mg）。 3 结构鉴定 　　化合物1为白色无定形粉末。HR-ESI-MS显示其准分子离子峰m/z 525.142 0[M-H ]-（计算值为526.147 5），结合NMR 推测其分子式为C27H26O11。其红外光谱可观察到有羟基（3 373 cm-1）、共轭羰基（1 710 cm-1）和苯环（1 606，1 514，1 458，1 361，1 271，826 cm-1）的特征吸收。1H-NMR（DMSO-d6，600 MHz）中，可观察到以下结构片段的质子信号：2个对位取代苯环[delta;：7.27（2H，d，J=8.4 Hz，H-7），6.72（2H，d，J=8.4 Hz，H-8）；7.87（2H，d，J=8.3 Hz），6.83（2H，d，J=8.3 Hz）]；1组四取代苯环的间位氢信号[del