丹参的超临界CO2提取工艺研究.docVIP

　　丹参的超临界CO2提取工艺研究 作者：李玲 何宇新 吴晶晶 吴金伟 【摘要】 目的 筛选丹参的超临界CO2提取最佳工艺条件。方法 采用L9(34)正交试验，以丹参酮ⅡA含量为指标进行正交试验，对丹参的超临界CO2提取工艺进行考察，同时将考察结果与传统提取方法进行比较。结果 丹参的超临界CO2提取最佳工艺为：取丹参药材粗粉（过20目筛）进行萃取，萃取压力为30 MPa，提取时间为2 h，萃取温度为40 ℃，解析压力为5 MPa.与传统乙醇回流提取方法相比较，丹参酮ⅡA 和丹酚酸B的提取率分别增加至1.25倍和1.58倍。结论 运用该工艺提取效率高，稳定性较好，且有效成分提取率高于传统提取方法，适合大生产。 【关键词】 丹参； 超临界CO2提取； 正交试验 【Abstract】 Objective To optimize the extraction process for Salvia miltiorrhiza Bge．by SFE CO2 .Methods The orthogonal experiment ine the optimum technologic parameters.Results The optimum process perature 40℃， extracting time 2h， separating pressure 5MPa．The extraction rate of tanshinoneⅡA and salvianolic acid B es higher than the trenditionerl method using alcohol.Conclusion 20Alite系统控制器，Prominence SIL20AC自动进样器，CTO20A柱温箱，SPD20AV UVVIS检测器，LC Solution 工作站）； 电子 天平BP121S； 丹参酮ⅡA对照品（供含量测定用，批号为110766200518，由 中国 药品生物制品检定所提供）； 丹酚酸B对照品（供含量测定用，批号为111562200605，由中国药品生物制品检定所提供）； 其它试剂均为分析纯。 1.2 材料 本实验所用丹参药材购于成都市五块石药材市场。 2 方法与结果 2.1 超临界CO2萃取样品溶液的制备 取丹参药材，粉碎，过20目筛，按所选因素及水平(见表1)，采用L9(34)正交表设计试验(见表2)进行丹参的超临界CO2提取，考虑到丹酚酸B为代表的水溶性物质在超临界CO2中溶解度不大，故加入乙醇作为夹带剂，得1～9号萃取物，进行含量测定。 2.2 乙醇回流提取样品溶液的制备 取丹参药材，粉碎，过20目筛，加入70 %乙醇8倍量，提取3次，每次1 h，滤过，合并滤液，进行含量测定。 2.3 含量测定 照高效液相色谱法（《 中国 药典》2005年版一部附录ⅥD）进行测定［3］。 2.3.1 丹参酮ⅡA 含量测定色谱条件 色谱柱：Diamonsil C18（4.6 mm×150 mm，5 μm）色谱柱； 流动相：甲醇水（75∶25）； 流速1.0 ml·min1； 检测波长：270nm； 柱温：35 ℃； 灵敏度：0.01AUFS，理论板数以丹参酮ⅡA 峰 计算 不低于3 000. 2.3.2 丹酚酸B含量测定色谱条件 Diamonsil C18（4.6mm×150 mm，5 μm）色谱柱； 流动相：甲醇乙腈甲酸水（30∶10∶3∶59）； 流速为1.0ml·min1； 检测波长286 nm； 柱温：35℃； 灵敏度：0.01 AUFS，理论板数以丹酚酸B 峰计算不低于3 000. 2.4 试验结果 2.4.1 超临界CO2萃取试验结果 采用中国医统软件包（PEMS）进行处理分析（见表3）。 表1 因素水平表表2 正交试验设计及结果表3 方差分析表 2.4.2 乙醇回流提取试验结果 丹参酮ⅡA含量为8.43 mg/g，丹参酚酸B含量为15.98 mg/g. 3 结论 上述结果表明：B因素有显著的影响，影响因素Bgt;Cgt;Agt;D； 且B2、C3、A2、D1为最佳，故丹参超临界CO2提取最佳工艺为：取丹参药材粗粉（过20目筛）进行萃取，萃取压力为30 MPa，提取时间为2 h，萃取温度为40℃，解析压力为5 MPa，与传统乙醇回流法相比较，丹参酮ⅡA含量增加至1.25倍，丹酚酸B含量增加至1.58倍。 4 讨论 超临界流体萃取技术(SFE)是近年来 发展 应用起来的一种集萃取、分离于一体的纯化技术，具有选择性好、操作温度低、效率高、速度快、无残留溶剂等优点［3］，该技术90年代开始被引进用于中药提取。超临界CO2对低