人血浆中穿心莲内酯的HPLCMS测定及生物等效性研究.docVIP

　　人血浆中穿心莲内酯的HPLCMS测定及生物等效性研究 作者：张志华，何周康，周彦彬，厉宇红，田娟，左英，丁劲松 【摘要】 目的：建立人血浆中的穿心莲内酯的HPLCMS测定法，研究两种穿心莲内酯分散片的相对生物利用度。方法：血浆样品液液萃取后，进行LCMS分析，色谱柱为汉邦C18柱（4.6 mm× 150 mm，5 μm），流动相为甲醇水（72∶28，v/v），检测离子为m/z 373. 6（穿心莲内酯）、m/z 267.7（奈韦拉平，内标）。20名健康志愿者采用随机交叉方式分别单次口服穿心莲内酯分散片T或R各0.15 g，在不同时间点取血，样品以新建立的HPLCMS法测定，研究比较两制剂的药动学参数及相对生物利用度。结果：穿心莲内酯在1.343～268.6 μg/L浓度范围内与峰面积比线性良好，最低定量浓度为1.343 μg/L。方法回收率为95.7%～104.7%，日内RSD小于6.4%，日间RSD小于12.4%。单剂量口服穿心莲内酯分散片T和R 0.15 g后两种制剂的Cmax 为（114.26±37.20）μg/L、（107.95±32.44）μg/L、；Tmax为（1.0±0.3）h、（1.1±0.3）h；AUC036 为（375.96±89.86）μg·h/L、（368.84±89.14）μg·h/L；AUC0∞为（388.39±91.14）μg·h/L、（382.81±97.14）μg·h/L；T1/2为（7.65±2.24）h、（7.90±2.16）h。结论：该方法选择性好，灵敏度高，可用于穿心莲内酯的体内过程研究。药动学参数经方差分析表明，穿心莲内酯分散片T和R中穿心莲内酯的主要药动学参数之间差异均无统计学意义，双单侧t检验结果表明两制剂为生物等效制剂。 【关键词】 穿心莲内酯；HPLCMS法；生物利用度；生物等效性 　　［Abstract］Objective: To develop an HPLCMS method to determine andrographolide in plasma and evaluate the bioavailability of andrographolide dispersible tablets. Methods: Sample preparation n (4.6 mm×150 mm, 5 μm) obile phase of methanol/z 373.6 for andrographolide and m/z 267.7 for the internal standard. In a randomized crossover design, 20 healthy male volunteers a samples ined by the neethod and the pharmacokiics and bioavailability it of quantity 1.343 μg·L-1, the methodology recoveries acokiic parameters of andrographolide after a single dose of T and R ax ax ethod is selective, sensitive and rapid for andrographolide determination. The results of ANOVA analysis and tacokiic parameters of the tulations and bioequivalence is observed. 　　［Key g/片，江西青峰药业有限公司，批。穿心莲内酯分散片T（50 mg/片，天津市汉康医药生物技术有限公司试制，批号050324）。甲醇（色谱纯，TEDIA pany）；水为纯化水；其它试剂均为国产分析纯（AR级）。 　　1.2 色谱条件及血样处理 　　1.2.1 色谱条件 　　汉邦C18柱（4.6 mm×150 mm, 5 μm）；柱温：25 ℃；流动相： 甲醇水（72∶28，v/v）；流速：1.0 mL/min分流进样。 　　1.2.2 质谱条件 　　毛细管电压：3.50 KV；锥孔电压：35 V；干燥气流速：500 L/h；离子源温度：120 ℃；辅助气温度：380 ℃；离子检测方式：选择性离子检测（SIM）；离子极性：正离子（positive）；离子化方式：气动辅助电喷雾离子化（ESI）；检测对象：穿心莲内酯，［M+Na］+，m/z 373.6；内标：奈韦拉平，［M+H］+，m/z 267.7。 　　1.2.3 血样处理 　　准确吸取血浆0.5 mL