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一、消毒与灭菌二、细菌的分类 教学要求 【掌握】 消毒、灭菌等基本概念 常用消毒灭菌方法及适用范围 细菌种、属、菌株、标准菌株的概念,细菌的命名原则和书写规则 【熟悉】 消毒灭菌的应用 【了解】 影响消毒灭菌效果的因素 消毒灭菌技术发展历史 1847年 匈牙利人塞麦尔维斯: 漂白粉洗手降低院内产褥热死亡率 1867年 英国人李斯特: 发明石碳酸消毒法, “腐烂是微生物引起的” 1886年 德国人伯格曼:蒸汽灭菌法 1890年 美国人哈斯特:戴橡胶手套 概念 概念 灭菌(sterilization) 杀灭物体上所有微生物的方法,包括芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。 消毒(disinfection) 杀死物体上病原微生物,不一定能杀死芽胞或非病原微生物的方法。 概念 防腐(antisepsis) 防止或抑制细菌生长繁殖的方法。 细菌一般不死亡。 清洁(cleaning) 通过除尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。 彻底清洗是保证消毒 或灭菌成功的关键 概念 “无菌物品” 进入人体内部手术器械、注射器、导管; 实验室所用培养基、试剂、器材等。 概念 无菌(asepsis): 不含活菌的意思。 无菌操作(aseptic technique): 防止微生物进入机体或物品的操作技术。 进行微生物实验、外科手术及医疗技术操作等过程,均需进行严格的无菌操作。 消毒灭菌的方法 物理消毒灭菌法 热力灭菌法 辐射杀菌法 滤过除菌法 干燥与低温抑菌法 化学消毒灭菌法 原理及分类 消毒灭菌的方法 热力灭菌法 (1)干热灭菌 a.焚烧 b.烧灼 c.干烤 (2)湿热灭菌 a.煮沸法 b.巴氏消毒法 c.间歇灭菌法 d.高压蒸汽灭菌法 干热灭菌 a.焚烧: b.烧灼: 干热灭菌 c.干烤: 160℃-170℃ 2小时。 适用于高温下不变质、不蒸发的物品,如玻璃器皿、瓷器等。 d.红外线 适用于医疗器械、食具 湿热灭菌比干热灭菌效力大 (1)菌体蛋白较易凝固; (2)穿透力大; (3)潜热。蒸气变为液态的潜热 湿热灭菌 湿热灭菌 湿热灭菌 d.间歇蒸汽灭菌法: 杀死细菌所有繁殖体和芽胞的灭菌法。 适用不耐高热含糖、牛奶的培养基。 湿热灭菌 e.高压蒸汽灭菌法: 103.4kPa,121℃,15-30min,杀死芽胞在内的所有微生物。 灭菌效果最好、目前应用最广 用于耐高温和不怕潮湿物品的灭菌。 灭菌效果监测 高压蒸汽灭菌法: 嗜热脂肪芽胞杆菌 环氧乙烷法: 枯草芽胞杆菌 辐射杀菌法 a.紫外线: 波长240-280nm,260nm最强 穿透力差,适用于实验室、无菌室、培养箱等的空气消毒及物品表面消毒。 注意防护:紫外线对眼睛和皮肤有刺激作用 紫外线消毒 辐射杀菌法 b.日光,微波 c.电离辐射: β射线、γ射线(如60Co)等,用于一次性医用塑料制品,食品保存。 穿透力强,可在包装后灭菌 辐照食品。 滤过除菌法 滤菌器filter 薄膜滤菌器: 孔径 0.1μm-0.45μm 硝基纤维素膜。常用0.22μm 深层滤器:石绵、玻璃滤菌器 用途:不耐高温灭菌的血清、细菌毒素、抗生素,以及空气等的除菌 。 不能除去支原体和病毒。 高效空气过滤器HEPA应用于无菌手术室、生物安全柜。 干燥与低温抑菌法 低温法:贮藏菌种 冷冻真空干燥法---最好的菌种保存方法 加入冷冻保护剂 -20℃~-70℃ 常用消毒剂类型作用机制及种类 常用消毒剂 高效消毒剂 含氯消毒剂: 次氯酸、漂白粉、二氯异氰酸尿酸钠 过氧化物消毒剂: 过氧乙酸、过氧化氢、二氧化氯 醛类消毒剂: 戊二醛(不腐蚀金属)、甲醛 环氧乙烷:800-1200mg/L 56℃ 6h 常用消毒剂 中效消毒剂 含碘消毒剂:碘伏、碘酊 醇类:乙醇70%~75% 低效消毒剂 季铵盐类:苯扎溴铵(新洁尔灭) 氯已定(洗必泰) 高锰酸钾 高危:需进入无菌组织的物品。灭菌 中危:接触黏膜的器械。消毒 低危:只接触未损伤皮肤。清洗、消毒 室内空气消毒灭菌 物理消毒法: ①紫外线照射(1.5W/m3,1h)最常用; ②滤过除菌:高效过滤装置 化学消毒法:过氧乙酸或过氧化氢喷雾、熏蒸 手和皮肤的消毒 用
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