仙茅提取物体外抗氧化活性研究.docVIP

　　仙茅提取物体外抗氧化活性研究 作者：张振东 吴兰芳 景永帅 杨娟 【摘要】 目的 探讨仙茅提取物的抗氧化活性。方法 先用80%乙醇，然后用蒸馏水对仙茅进行提取，其中醇提浸膏依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取；水提部分经醇沉，制备仙茅粗多糖。分别观察仙茅各提取物对羟基自由基 （·OH）、1,1二苯基2苦基苯肼自由基(DPPH·)的清除率以及对Fe3+还原力。结果 与抗坏血酸比较，仙茅提取物对自由基均有较强清除作用，对·OH的清除率乙酸乙酯萃取物＞正丁醇萃取物＞粗多糖＞总醇提物，IC50值分别为0.247、0.358、0.796和0.871 mg/ml；对DPPH·的清除率乙酸乙酯萃取物gt;正丁醇萃取物gt;总醇萃取物gt;氯仿萃取物gt;石油醚萃取物gt;粗多糖，其IC50值分别为0.026、0.055、0.620、0.071、0.122和0.275 mg/ml。不同提取物对Fe3+有较强还原能力，还原力大小为：乙酸乙酯萃取物gt;正丁醇萃取物gt;总醇提物gt;氯仿萃取物gt;石油醚萃取物gt;粗多糖。结论 仙茅具有明显的抗氧化活性，在抗衰老方面有广泛的应用前景。 【关键词】 仙茅；抗氧化能力；清除自由基；还原力 【Abstract】Objective To study on antioxidant activities of extracts from Curculigo orchioide in vitro. Methods Curculigo orchioides ether, chloroform, ethyl acetate, nbutanol. At the same time, crude polysaccharide extractgt; petroleum ether extractgt; polysaccharide, and the corresponding IC50 values g/ml, respectively. Different extracts had strong deoxidization ability of Fe3+, the activities sequence extractgt; petroleum ether extractgt; polysaccharide. Conclusions Curculigo orchioides have stronger antioxidative activities and 处有最大吸收。取醇提部分萃取物各50 mg，用无水乙醇定容至25 ml；取粗多糖50 mg，用蒸馏水定容至25 ml，配制成质量浓度为2 mg/ml，再以该质量浓度溶液配制成所需浓度。加入一定浓度样品4 ml，9 mmol/L FeSO4 0.5 ml，9 mmol/L水杨酸0.5 ml，8.8 mmol/L H2O2 0.5 ml，混匀，于37 ℃水浴中加热30 min，510 nm测定样品吸光度（Ai）。将体系中的样品改为加入4 ml蒸馏水，测定得空白对照吸光度（Ao），向体系中加入0.5 ml蒸馏水代替8.8 mmol/L H2O2，测定得样品本底吸光度（Aj），其中样品吸光度（Ai）每个质量浓度做3个平行，取平均值，以Vc作阳性对照，按下式 计算 清除率：K(%)=〔Ao-(Ai-Aj)〕/Ao×100。 　　1.4.2 清除DPPH·〔10〕 　　DPPH·是一种稳定的自由基，在有机溶剂中呈紫色，在517 nm处有较大吸收，当加入抗氧化剂一部分自由基被清除掉，使该波长下吸收强度减弱，可借此来评价某物质的抗氧化活性。取醇提部分萃取物各50 mg，分别用无水乙醇溶解并定容至25 ml；取粗多糖50 mg，蒸馏水定容至25 ml，配制成质量浓度为2 mg/ml样品，再以该质量浓度配制成所需浓度。以无水乙醇配制0.16 mmol/L DPPH·溶液，置于棕色容量瓶中。取3 ml样品溶液加入3 ml DPPH·溶液于25 ℃水浴中加热15 min后，在517 nm测得试样吸光度（Ai），取3 ml蒸馏水代替样品测得空白吸光度（Ao），以3 ml样品中加入3 ml蒸馏水测得样品本底吸光度（Aj），其中（Ai）每个样品质量浓度做3个平行，取平均值。以Vc作阳性对照，按下式计算清除率：K(%)=〔Ao(Ai Aj)〕/Ao×100。 　　1.4.3 Fe3+还原力实验测定〔11〕 　　取2.5 ml不同质量浓度的样品溶液，加入0.2 mol/L，pH 6.6磷酸缓冲液2.5 ml及1% 铁氰化钾2.5 ml，50 ℃水浴反应20 min后急速冷却，加入10%三氟乙酸溶液2.5 ml混匀，0.2 μm水相滤膜过滤，取上清