KTApurifier全自动层析仪操作规程.PDFVIP

ÄKTApurifier 全自动层析仪操作规程 1. 开机 打开主机和电脑电源，待仪器自检完毕（CU950 上面的3 个指示灯完全点亮不闪烁），双击桌面 上UNICORN 图标，进入操作界面。 2. 准备流动相和样品 所有的工作溶液和样品必须经过0.45µm 的滤膜过滤，样品也可高速离心后取上清备用。当缓冲 液中含有有机溶剂（如乙腈、甲醇），需在使用前用低频超声脱气10min。 3. 清洗管道及装柱 3.1 首先将A1 管道放入平衡液或banding buffering 中，将B1 管道放入高盐溶液中或elution buffering 中，在system control 窗口点击manual→pump→pump wash basic，选中A1,B1 管道 ON execute 为 ， 。泵清洗程序会自动运行结束。 3.2 选择manual→pump→flow rate ，输入流速1ml/ml，insert；选择manual→Alarmmon→ alarm pressure high alarm insert ，设置 （输入填料的耐受压力，可在填料说明书中查到）， ， execute 。将进样阀的1 号位管道接入柱子的柱头，稍微拧紧后将柱下端的堵头卸掉，直接拧入紫 外流动池或连接管道。 4. 手动运行 4.1 平衡 COND pH manual 柱子平衡好了（观察电导 ， 的数值正确曲线走稳了）。此时将紫外调零，选择 →Alarmmon→autozero，exectue，就准备上样了。 4.2 上样 4.2.1 3 用样品环上，将样品吸进注射器，推掉气泡，从进样阀的 号位推入（进样量不得低于样 品环的体积的2 倍），不要取下注射器。选择manual→flowpath→injectionValve→inject， execute 。 4.2.2 用样品泵上样（AKTAexplorer 系统），将样品置于Sample Valve 1 号位（可以选8 个不同 的位置），点击manual→pump→Direct Load_960 输入进样流速和体积，execute 。注意样品的 管路要事先充满缓冲液。 4.2.3 用系统泵上样：点击pause，将A1 放入样品中，点击countine ；待样品上完后，再将A1 放入到平衡液中继续清洗柱子。 4.3 洗脱 用缓冲液尽量将穿透峰洗回基线。选择manual→pump→gradient，按照自己的条件选择target ％B （例如100％）和length （例如20min ），execute 。 4.4 收集 4.4.1 manual Frac fractionation_900, exectue 固定体积收集：选择 → → 输入每管收集体积， 。结 束固定体积收集选择Frac→fractionation_stop_900 ，exectue 。 4.4.2 峰收集：选择manual→Frac→Peak_FracParametersUV，输入峰收集参数，insert，点击 Peak_Fractionation_900，输入每管最大收集体积，insert，exectue 。结束峰收集，选择 Peak_FracStop_900,execute。 5. 编程及自动运行 5.1 点击mothed editor 窗口里工具栏的mothed wizard 快捷图标，打开对话框。 5.2 按照对话框的要求选择条件，编好后按finish 出现编程结果，在变量框中可以更改变量。保 存点击工具栏里的保存快捷图标，输入文件名，点击ok 。 5.3 运行自动程