中学生物浙科版选修3复习课件：克.ppt

动物体内一部分组织 分散的单个细胞 机械消化 或 胰酶消化 原代培养 传代培养 分散成单个细胞后容易培养，细胞所需的营养容易供应，其代谢废物容易排出；同时，分散成单个细胞培养，可使得在细胞水平操作的其他技术得以实现。 用酶消化的是细胞间基质，细胞间基质主要成分有胶原蛋白、层粘连蛋白、纤粘连蛋白、弹性蛋白等成分。用胰蛋白酶可使其消化，从而使细胞相互分离。 为什么动物细胞要分散成单个细胞培养？用酶消化的是什么物质？ 动物体内一部分组织 分散的单个细胞 机械消化 或 胰酶消化 原代培养 传代培养 原代培养到一定时期，细胞会因为密度过大和代谢消耗引起营养枯竭，有害代谢产物积累，导致细胞不能正常生长，贴壁生长还会出现接触抑制现象，所以需要进行传代培养。 ? 动物体内一部分组织 分散的单个细胞 机械消化 或 胰酶消化 原代培养 传代培养 分瓶前的培养是原代培养，分瓶后的培养为传代培养。 细胞系： 原代培养物开始第一次传代培养后的细胞称之为细胞系。 其中，能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系，不能连续培养的细胞称为有限细胞系。 大多数二倍体细胞为有限细胞系。无限细胞本质上已是发生转化（遗传物质改变）的细胞系，如肿瘤细胞。 细胞株： 用单细胞分离法或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群，称细胞株。 动物体内一部分组织 分散的单个细胞 机械消化 或 胰酶消化 原代培养 传代培养 动物血清 使用CO2培养箱 把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术叫做克隆培养法（细胞克隆）。 克隆培养法 （细胞克隆） 95%空气＋5%CO2。 O2是细胞代谢所必需的， CO2的主要作用是维持培养液的pH。 * 完成胚胎发育的必要的环境条件（如细胞生长、分化的实验条件；怀胎母体的子宫环境等） * ②用于快速繁殖无性系，即从一个器官、组织或细胞经过多代培养而得到的后代。现一些无性系已在生产实践上广泛应用。如20世纪60年代发展起来的“兰花工业”，就是用从的原球茎得到的无性系进行繁殖的工业化生产。③用于培养无病毒植株。植物的幼嫩部分一般尚未感染病毒。在生产上用茎尖培养方法获得无病毒苗再移栽到大田，可提高产量。无病毒苗的培养还有利于地区之间或国家之间的相互引种。④用于改良植物品种。应用较广的是通过花药培养获得单倍体植株的方法。此外，还可用胚珠培养以及试管受精克服杂交不育性；用细胞培养诱发突变，筛选抗性强或品质优的细胞株；以及通过原生质体融合（体细胞杂交），创造新类型植物等。试管苗的冷冻贮藏则是一种较为方便的种质保存方法。⑤用于植物性药物生产。如用组织培养方法生产鱼藤酮、甘草甜素、、薯芋皂苷元等。 * 例如20世纪50年代，科学家在两栖类动物进行克隆实验，60年代，我们著名的胚胎学家童第周和牛满江教授在鲤鱼和金鱼之间，用囊胚细胞核移植的方法，得到首批克隆鱼。在哺乳类动物，利用胚胎细胞克隆，是在20世界80年代以后的事，此后的20多年，陆续有用胚胎细胞克隆羊、猪、牛、鼠等的报道，特别有意义的是中国学者孟励在美国首次用胚胎细胞克隆猴成功。这些都属于用胚胎细胞克隆的动物，也可以说还没有超越有性生殖的范畴。 * * 而用大块组织培养时，内部细胞的营养供应和代谢废物的排出都较困难，因此，这些细胞在体外长时间的生存和生长就较困难。 * 原代培养：将组织从机体取出后，先用胰蛋白酶处理使组织分散为单个细胞，然后在用细胞悬浮液进行培养的过程。 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。 （1）植物的组织培养 Ⅰ （2）动物的细胞培养与体细胞克隆 Ⅰ 第二章 克隆技术 分子水平 细胞水平 个体水平 植物的克隆 动物的克隆 原理： 植物细胞的全能性 技术 原理 动物细胞核的全能性 技术 植物组织培养 原生质体培养 动物细胞培养 克隆培养法 动物体细胞核移植 ①基因克隆（分子水平） ②细胞克隆（细胞水平） ③个体克隆（植物克隆和动物克隆） 一、克隆概念的发展（三个水平） 单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 细胞水平的克隆 二、克隆技术的发展 1、微生物克隆（细胞克隆） 2、遗传工程克隆（DNA克隆） 3、个体水平克隆 三、 动物克隆的条件 1、理论条件 2、基本条件 ①具有包含物种完整基因组的细胞核的活性细胞； ②能有效调控细胞核发育的细胞质物质； ③完成胚胎发育的必要的环境条件。 细胞(主要是包含遗传物质的细胞核)具有的发育全能性。 理论基础 植物组织培养 核心概念 植物细胞工程 植物细胞的全能性 细胞具