支原体培养基灵敏度检査(变色单位试验法).pdf

三药 变色单位试验法及供试品检查 支原体培养基灵敏度检査（变色单位试验法） 及供试品检查方案 目的： 建立支原体培养基灵敏度检査（变色单位试验法）及供试品检查方案。 范围： 适用于支原体培养基灵敏度检査及供试品检查。 依据： 《中国药典》2015 年版 内容: 1、概要： 除药典推荐培养基外，亦可使用可支持支原体生长的其他培养基，但灵敏度 必须符合要求。 2 、设备 生化培养箱、生物安全柜。 3、培养基灵敏度检査（变色单位试验法） 3.1 干粉培养基及对应菌种 产品号 产品名称 菌种名称 菌种编号 11109 支原体肉汤培养基 肺炎支原体 ATCC 15531 株 11C21 精氨酸支原体肉汤培养基 口腔支原体 ATCC 23714 株 11A09 支原体半流体培养基 肺炎支原体 ATCC 15531 株 11321 精氨酸支原体半流体培养基 口腔支原体 ATCC 23714 株 3.2 培养基配制 按照标签处方量配制成液体培养基，并按标签规定的温度和时间进行湿热灭 菌，待用。 3.3 灵敏度检查 3.3.1 菌液制备 将菌种接种于适宜的支原体培养基中，经36℃±1℃培养至培养基变色，盲 传两代。 三药 变色单位试验法及供试品检查 3.3.2 培养基接种及培养 将培养物接种至待检培养基中，做 10 倍系列稀释，肺炎支原体稀释至 10-7 〜10-9 ，接种在支原体肉汤培养基内；口腔支原体稀释至10-3〜10-5 ，接种在精氨 酸支原体肉汤培养基内。每个稀释度接种 3 支试管，置 36℃±1℃培养 7〜14 天，观察培养基变色结果。 3.3.3 结果判定： 以接种后培养基管数的2 / 3 以上呈现变色的最高稀释度为该培养基的灵敏 度。 灵敏度应达到： 支原体肉汤培养基：肺炎支原体（ATCC 15531 株）应达到10-8 ； 精氨酸支原体肉汤培养基：口腔支原体( ATCC 23714 株)应达到10- 4 。 3.3 供试品检查法 3.1 干粉培养基及对应菌种 产品类型 产品名称 产品号 液体培养基 支原体肉汤培养基 11109 精氨酸支原体肉汤培养基 11C21 半流体培养基 支原体半流体培养基 11A09 精氨酸支原体半流体培养基 11321 或：琼脂培养基 支原体琼脂培养基 11C23 3.2 配制 半流体培养基（或琼脂培养基) 按照标签处方量配制，并按标签规定的温度 和时间进行湿热灭菌；在使用前应煮沸10〜15 分钟，冷却至56°C 左右，然后加 人灭能小牛血清（培养基: 血清为 8 ：2) ，并可酌情加入适量青霉素，充分摇 匀。液体培养基除无需煮沸外，使用前亦应同样补加上述成分。 3.3 检查 取每支装量为10ml 的支原体液体培养基各4 支、相应的支