改良羊水细胞染色体制备法在产前诊断中的效果分析.pdf

维普资讯 · 476 · 堡 堂速 堂苤壶20(P3年8月第22卷第4期 ChinJMedGenet，August2005，Vo1．22，No．4 · 经 验 交 流 · 改良羊水细胞染色体制备法在产前诊断中的效果分析 周玉春 王华 黄定梅 彭向京 贾政军 禹虹 雷花香 马晓琦 摘【要】 目的 探讨改良羊水细胞染色体制片法在产前诊断中的效果。方法 对孕 14．3～37周具有 产前诊断指征的孕妇，抽取羊水细胞培养6～7天，换液第 2天取出观察，当有许多圆形透亮的细胞时，加入 秋水仙素3h后收获。改良收获过程，将上清倒入离心管处理，瓶内细胞经低渗、预固定、固定后 ，刮下瓶壁 细胞离心制片。结果 692例羊水细胞培养成功 691例 ，成功率 99．86％；24～37孕周的成功率与 42孕 周比较，差异无统计学意义(P0．05)；90．74％的收获时间是 7～8天；有效分裂相数为20～118个以上的 占97．83％，较原方法有显著提高(P0．01)。结论 该方法有效分裂相多、出结果快、成功率高。 【关键词】羊水细胞； 产前诊断；效果评价 羊水细胞培养技术用于产前诊断始于上世纪 60年代，羊 获时间是 7～8天，其中，又以8天收获时间 占的比例最高，为 水细胞培养成功与否是产前诊断的关键。为了提高羊水细胞 83．79％。不同孕周病例的羊水细胞培养收获时间显示 出差 培养成功率，我们在传统的羊水细胞培养[-·2]技术基础上进行 异，24孕周以下的病例 ，羊水细胞培养收获时间7～8天者 占的 探索，不断改进细胞收获过程，获得很好效果。现报告如下。 比例高于24～37周的孕妇，而收获时间为9天及 10天以上 占 的比例低于24～37孕周 ，经卡方检验，两者之间的差别有统计 1 材料与方法 学意义 (2=11．74，P0．01)。 1．1 标本来源与采集 2003年 11月至2005年 1月，对来我院 2．3 有效分裂相与染色体核型分析结果 如表2所示，在691 产前诊断中心遗传咨询门诊就诊疑有染色体病胎儿的高危孕 例标本 中，有效分裂相数为 02 ～118个 以上 的676例，占 妇，采用改良羊水细胞染色体制备法，进行产前诊断，共计692 97．83％，与我室第 1次改进的羊水细胞培养方法 (有效分裂相 例。在B超引导下，用 7号针经腹抽取羊水 20～30mL，置 15 数为2o及以上的42例，占84．00％)比较[引，经卡方检验，两者 mL无菌离心管中待检。 之间的差异具有极显著统计学意义 (x=29．65，P0．01)。核 1．2 细胞培养 将羊水离心，弃上清液，留下0．5mL，吸 1mL 型分析结果显示：691例中644例正常，占93．2％；多态26例， 培养液混匀，吸入装有培养基的培养瓶中，每例接种2瓶，放入 占3．76％；异常染色体(含平衡易位；21三体；13三体；14三体； 3712培养箱中培养，于第6～7天取出置显微镜下观察 ，换液继 18三体；部分三体；47，XYY；45，x；47，XX，+mar；46，XY，4P+ 续培养。 等)2l例 ，占3．04％。 1．3 染色体制片与核型分析 于换液后的第 2天取出，观察 3 讨论 细胞群落数与细胞分裂情况。当出现许多圆形透亮的有丝分 裂细胞时，加入秋水仙素继续培养 3h后，分两步进行收获：首 3．1 应用羊水细胞培养进行产前诊断是一项综合性很强的技 先把上清倒入离心管中进行离心，低渗 、预固定、固定；再将培 术。从羊