李振,-----晋中绵羊耳成纤维细胞系建立.pdf

遗传育种 晋中绵羊耳成纤维细胞系建立 李振，靳辉，黄洋，张春香 (山西农业大学动物科技学院，太谷030801) 摘要：以晋中绵羊耳缘组织为材料，采用组织块贴壁培养法，通过原代培养和传代培养对细胞进行了细胞形态 学观察、细胞计数和生长曲线的绘制，探讨了细胞体外培养模式。结果：细胞生长总体趋势呈“s”型；建立了晋 中绵羊耳成纤维细胞系，细胞系的建立，使晋中绵羊的重要绅质资源在细胞水平上保存下来。 关键词：晋中绵羊；成纤维细胞系；细胞培养 中图分类号：$826．2 文献标志lig：A 文章编号：2095—3887(2012)03—0009—04 EstablishmentofFibroblastCellLine inJinzhongSheep LiZhen，Jin al Hui，ZhangChun-fiang，et (CoUege as fibroblastcelllinewasestablishedthemethodofex— ear the roaterials．a Jingzhong margin study hy Abstract：Takingsheep culture．Observationson ofcelt cultureandsubculturecultureweTecarriedout．Cellsfrom adherence primary plant morp_hology ineach resultsshowedthecell curvewasall 3wellswerecountedand curveswereobserved growth groupeveryday．The growth establishedcelllinecould the resources onthecelllevel． s-shapedtype．Thenewly preservedgermplasmofJinzhongsheep cellline；cellculture Keywords：Jinzhongsheep；fibroblast 动物细胞培养开始于上世纪初，到1962年规模开 耳成纤维细胞培养。从2只l周龄羔羊耳部剪取4片1— 始扩大，发展至今已成为生物、医学研究和应用中广泛 2Cr02的耳组织。 采用的技术方法H】。成纤维细胞被广泛应用于细胞或分 1．1．2培养基及其他主要试剂细胞培养基为DMEM／ 子生物学研究的许多方面，这主要是由于成纤维细胞是 最易培养的细胞。在常用的培养液中，已实现传代的成 larbio)、胶原酶IV、PBS溶液、胎牛血清、HE染色试剂盒、 纤维细胞的生命周期约50代【2]。此外，成纤维细胞良好 秋水仙素均购自TaK8R丑公司。其他试剂，如KCl、冰醋 的耐受性使之易于进行从基因转染到微注射等较多领 酸、甲醇、吉姆萨染液等均为常用试剂，购自康为世纪公 域的研究。而如何简便、高效地获得丰富的供体细胞则 司。 是该技术关键的上游步骤之一。动物的皮肤是理想的供