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04 兔抗大肠杆菌O157H7抗血清制备及鉴定.pdf

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04 兔抗大肠杆菌O157H7抗血清制备及鉴定

2·82 · 中国卫生检验杂志 1999 年第 9 卷第 4 期 离心 15 , 小心倒掉上清液并使试管倒立放置 选择同一份样品, 以不同的时间去除蛋白提取糖 m in m in 10 。 原, 结果见表 2。由表2 可知, 肝糖原含量随肝脏放置时 m in 2 2 糖原的转化 用 2 蒸馏水溶解糖原, 加水时将 间的推移而降低, 这是由于肝脏中含有丰富的 6- 磷酸 m l 管壁的糖原洗下直至完全溶解。将样品管置于冷水浴 葡萄糖磷酸酶, 催化 6 - 磷酸葡萄糖水解生成葡萄 中, 加 10 蒽酮试剂直接进入管子中央, 保证充分混 〔2 〕 m l 糖 , 以至于葡萄糖在2 2 步骤中溶解于 95% 乙醇的 合好, 在所有管子都达到凉水温度后, 将其浸于沸水浴 结果。 ( ) 水浴深度略高于管子液面 15 , 然后移到冷水浴, 表 2 肝糖原含量随肝脏放置时间的影响 m in 冷却到室温。在 620nm 波长下测定吸光度。 单位( 100 ) m g g 3 实验结果与讨论 时间 9 ∶00 9 ∶30 10 ∶00 10 ∶30 11 ∶00 31 线性与精密度评价 1 2107 1 14965 13270 9138 3622 ( ) 用系列浓度 0 1000~ 0 5000 葡萄糖标准液, g L 时间 9 ∶00 9 ∶30 10 ∶00 10 ∶30 11 ∶00 峰高(Y ) 与葡萄糖浓度(C ) 的线性回归方程为: Y = 1. 2 2792 3 2104 4 17025 11500 5861 823C - 0. 0036 (r= 0. 9998) 。用混合样品做 10 次平行, 34 静置的方式对糖原结晶体的影响 测得 ± = 0 3103 ±0 01042  = 3 36% X S R SD ①按实验方法制备糖原晶体, ②按 2 1 方法去除 32 肝糖原随不同试验时间的变化 蛋白后的溶液, 取 1 上清液放入 10 离心管中, 每 m l m l ( ) 将 5 组 每组 8 只 同样实验条件的老鼠, 选择不同 管加入 95% 的乙醇 4 , 充分混匀。用干净塞子塞上,

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